Phương pháp pha loãng nối tiếp

Phương pháp pha loãng nối tiếp là một trong những phương pháp phổ biến nhất để xác định độ nhạy cảm của vi sinh vật với kháng sinh hoặc các loại thuốc chống vi trùng khác. Nó dựa trên việc thêm cùng một lượng vi sinh vật vào môi trường dinh dưỡng có nồng độ chất thử nghiệm nhất định và xác định nồng độ tối thiểu không cho phép chúng phát triển và sinh sản.

Để thực hiện phương pháp pha loãng nối tiếp, cần sử dụng môi trường dinh dưỡng có chứa một lượng chất thử nhất định. Sau đó, cùng một lượng vi sinh vật sẽ được kiểm tra độ nhạy sẽ được thêm vào từng môi trường. Sau đó, môi trường được đặt trong tủ ấm trong một khoảng thời gian xác định để vi sinh vật bắt đầu phát triển.

Sự phát triển của vi sinh vật trong mỗi môi trường sau đó được xác định. Nếu vi sinh vật không phát triển hoặc phát triển yếu thì nồng độ chất thử được coi là cao và không cho vi sinh vật sinh sôi. Nếu vi sinh vật phát triển tốt thì nồng độ của chất này được coi là thấp và cho phép chúng sinh sôi. Do đó, bằng cách sử dụng phương pháp pha loãng nối tiếp, có thể xác định được nồng độ của chất thử sẽ có hiệu quả trong việc tiêu diệt vi sinh vật.

Phương pháp pha loãng nối tiếp được sử dụng rộng rãi trong y học để xác định độ nhạy cảm của vi khuẩn với kháng sinh. Nó cũng có thể được sử dụng để xác định sức đề kháng của vi sinh vật với các chất kháng khuẩn khác, chẳng hạn như thuốc sát trùng hoặc thuốc khử trùng. Ngoài ra, phương pháp pha loãng nối tiếp có thể được sử dụng để xác định hoạt tính sinh học của các chất khác nhau chống lại vi sinh vật.

Phương pháp pha loãng nối tiếp

Phương pháp này được sử dụng để xác định độ nhạy (sức đề kháng) của vi sinh vật phân lập với các chất kháng khuẩn khi nghiên cứu hiệu quả của microbiocenosis (sinh thái cục bộ của vi sinh vật trong công nghệ sinh học y tế và thực phẩm. Bản chất của phương pháp là đưa các vi sinh vật đã được thử nghiệm bằng cồn giống nhau ( hoặc xét nghiệm). Phương pháp này dựa trên công thức sai được trình bày bên dưới “yếu tố M - S”, theo đó mỗi chất có lượng tối thiểu ( tới hạn), được gọi là nồng độ ức chế tối thiểu (MIC), có khả năng ngăn chặn sự phát triển Để mô tả tác dụng của một chất hoặc kháng sinh, khái niệm nồng độ ức chế tối thiểu được sử dụng (MIC) là hàm lượng (nồng độ) thấp nhất của thành phần có hiệu quả, đảm bảo không có sự phát triển của khuẩn lạc nhìn thấy được sau khi ủ 7 ngày.

Theo các tiêu chuẩn hiện có, MIC/MPC phải lớn hơn MPC ít nhất 2 bậc.

Pha loãng nối tiếp (MR) là phương pháp chính để kiểm soát chất lượng vi sinh trong nghiên cứu khoa học và thực hành lâm sàng. Nó được sử dụng để xác định khả năng kháng thuốc hoặc enzym của vi sinh vật, cũng như phát hiện các đặc tính độc lực của vi sinh vật. Phương pháp này cũng có thể được sử dụng để kiểm tra hoạt tính sinh hóa của thuốc hoặc enzyme chống lại vi khuẩn và nấm.

Bản chất của phương pháp MR là việc nuôi cấy vi sinh vật đang nghiên cứu được đưa vào môi trường dinh dưỡng ở các nồng độ khác nhau của một loại thuốc nhất định và nồng độ ngăn chặn sự phát triển của tế bào được xác định. Bằng cách này, có thể thiết lập mức hoạt chất tối thiểu cần thiết để ức chế sự tăng trưởng. Thông thường để dùng thuốc