Pembekuan dalam Teknik Histologis

Pembekuan dalam Teknik Histologis: Fitur dan Aplikasi

Dalam teknologi histologis, pembekuan adalah salah satu metode paling umum untuk menyiapkan sediaan jaringan. Metode ini sangat berharga untuk penelitian yang memerlukan pelestarian sebanyak mungkin karakteristik biokimia dan morfologi jaringan. Pembekuan memungkinkan Anda mendinginkan potongan jaringan dengan cepat, sehingga memungkinkan Anda mempertahankan jumlah maksimum zat aktif biologis di dalamnya.

Metode pembuatan sediaan histologis dengan pembekuan dilakukan dengan menggunakan karbon dioksida padat. Cara ini adalah salah satu yang paling efektif dan memungkinkan Anda memperoleh obat berkualitas tinggi yang tidak memerlukan pengolahan tambahan.

Proses pembekuan dimulai dengan pendinginan cepat potongan jaringan dalam karbon dioksida padat. Dalam hal ini, es terbentuk, yang memperbaiki jaringan dan mempertahankan strukturnya. Spesimen kemudian dipotong menjadi beberapa bagian yang sangat tipis menggunakan mikrotom. Bagian tipis ditempatkan pada kaca objek, setelah itu sediaan diwarnai dengan pewarna khusus.

Keuntungan pembekuan dalam teknik histologis sudah jelas. Pertama, metode ini memungkinkan untuk mempertahankan karakteristik biokimia dan morfologi jaringan semaksimal mungkin. Kedua, pembekuan memberikan kejernihan gambar yang tinggi, yang penting untuk studi diagnostik. Ketiga, metode ini memungkinkan diperolehnya obat berkualitas tinggi tanpa perlakuan kimia tambahan, sehingga mengurangi waktu dan biaya penelitian.

Namun, perlu dicatat bahwa pembekuan tidak selalu merupakan metode optimal untuk menyiapkan sediaan jaringan. Beberapa jenis jaringan mungkin sensitif terhadap pembekuan dan dapat mengubah struktur dan sifatnya. Selain itu, pembekuan dapat mengakibatkan artefak yang dapat mempengaruhi hasil pengujian.

Oleh karena itu, pembekuan merupakan metode penting dalam teknik histologis, yang memungkinkan pelestarian karakteristik biokimia dan morfologi jaringan secara maksimal. Namun, sebelum menggunakan metode ini, karakteristik jaringan yang diteliti dan kemungkinan keterbatasan metode ini harus diperhitungkan.

Teknik histologis adalah suatu metode untuk mempelajari jaringan tubuh manusia. Untuk memperoleh sampel yang berkualitas, perlu dilakukan proses seperti pembekuan bahan biologis. Apa itu pembekuan?

Pembekuan bukan sekadar menghentikan molekul dan saraf sesaat. Ketika suhu suatu benda turun di bawah titik beku (+3,8 Celcius), air di dalam sel membeku, membuat jaringan menjadi lebih keras. Untuk memutar kembali kubus tisu dari air beku menjadi air cair secara efektif, Anda perlu memaparkannya pada suhu di atas titik beku. Untuk melakukan hal ini, pembekuan harus terjadi dengan sangat cepat, untuk itu digunakan suspensi dalam karbon dioksida padat (CO2).

Untuk persiapannya, potongan tisu medis disimpan dalam cairan khusus yang mengandung krioprotektan (etanol) dan buffer (natrium lauril sulfat). Mereka ditempatkan di CO2, yang diisi dengan material dengan luas permukaan yang sangat besar. Larutan tersebut kemudian dilepaskan ke udara, di mana ia melepaskan berat CO2 ke lapisan CO2 di sekitarnya - gelembung kecil CO2 mengembang, mendinginkan permukaan dan segera membuatnya menjadi cair. Ini mempercepat proses pembekuan dan mendistribusikan CO2 secara merata ke seluruh kubus jaringan. Kolom es kering mengapung saat bersentuhan dengan ionogen kecil di dalam kubus jaringan (yang menyebabkan jaringan membeku lebih cepat saat bersentuhan).