Un croisement dihybride est le croisement de deux lignées pures d’organismes qui diffèrent par deux ou plusieurs traits. Les croisements dihybrides donnent naissance à des descendants présentant différentes combinaisons de caractéristiques héritées de leurs parents.
Le but de l’hybridation dihybride est d’identifier les traits et caractéristiques individuels hérités en combinaison et de découvrir comment ils sont liés les uns aux autres. Ceci est d'une grande importance pour comprendre les processus de l'hérédité et leur utilisation dans l'élevage de cultures et d'animaux afin d'augmenter la productivité et d'améliorer la qualité des produits. Les croisements d'analyse dihybride incluent le croisement de toutes les paires possibles de deux lignées pures. Le résultat sera une tétrade de groupes composés de quatre variétés. Dans chaque groupe, il y a une uniformité dans une paire et une variabilité dans l’autre. On peut noter que chaque groupe comprend cinq individus, deux lignées phénotypiquement pures, une lignée hémique pure ou un phénotype intermédiaire.
Dans un croisement test dihybride, les lignées pures qui sont habituellement sélectionnées sont appelées lignées récessives. Avec un tel croisement, les lignées pures originales remplacent leurs gènes par endroits dans les gamètes, en totale conformité avec la règle de Mendel. Pour chaque paire d'allèles considérée dans un phénotype donné, les règles 1 par 2 et trois par quatre s'appliquent. Par exemple, un buisson de cocconitropsis homozygote de race pure transférera ses deux gènes dominants via F2 - 1 - cocconitropie jaune, 1 - vert. Ensuite, trois gènes récessifs sont échangés via - F3 - à caractère récessif, on obtient une variété jaune, et à caractère dominant, une variété verte. Pour calculer un filleul, il faut obtenir cinquante descendants, sous réserve de la présence de gamètes chez chaque individu. Le nombre de plantes est réduit à une. L'hybridation dihybride est un exemple classique de l'héritage de caractères dans l'analyse génétique des formes alléliques de divers gènes.