Le milieu de Killian est un milieu nutritif utilisé pour la culture de micro-organismes. Il a été développé et décrit pour la première fois en 1903 par le bactériologiste allemand Joseph Killian.
Le milieu de Killian contient de l'extrait de moût de malt, de la peptone et du glucose comme sources nutritives. Il contient également des sels inorganiques tels que des phosphates pour offrir des conditions optimales pour la croissance des micro-organismes. La réaction du milieu est légèrement alcaline, le pH est de 7,2 à 7,4.
Le milieu nutritif de Killian est enrichi, c'est-à-dire qu'il contient une grande quantité de nutriments. Cela permet d’y cultiver un large éventail de micro-organismes, notamment des bactéries et des levures. Il est particulièrement bien adapté à l’isolement de microbes pathogènes à partir d’échantillons cliniques.
Le milieu de Killian est encore largement utilisé dans les laboratoires de microbiologie pour cultiver divers micro-organismes à des fins de diagnostic.