Killian ortamı, mikroorganizmaların kültürlenmesi için kullanılan bir besin ortamıdır. İlk kez 1903 yılında Alman bakteriyolog Joseph Killian tarafından geliştirildi ve tanımlandı.
Killian'ın ortamı besin kaynağı olarak malt şırası ekstraktı, pepton ve glikoz içerir. Ayrıca mikroorganizmaların büyümesi için en uygun koşulları sağlamak üzere fosfatlar gibi inorganik tuzlar da içerir. Ortamın reaksiyonu hafif alkalidir, pH 7.2-7.4'tür.
Killian'ın besin ortamı zenginleştirilmiştir, bu da büyük miktarda besin içerdiği anlamına gelir. Bu, bakteri ve maya da dahil olmak üzere çok çeşitli mikroorganizmaların yetiştirilmesine olanak tanır. Patojenik mikropların klinik örneklerden izolasyonu için özellikle uygundur.
Killian besiyeri, mikrobiyoloji laboratuvarlarında teşhis çalışmaları için çeşitli mikroorganizmaların yetiştirilmesinde hala yaygın olarak kullanılmaktadır.