Ouchterlonun menetelmä

Ouchterlonu-menetelmä: Tarkkuusdiagnostiikka immunologiassa ja bakteriologiassa

Ouchterlony-menetelmä, joka tunnetaan myös nimellä O. ouchterlony-immunodiffuusiomenetelmä, on yksi immunologian ja bakteriologian alan avaintekniikoista. Tämän menetelmän kehitti ruotsalainen tiedemies Ouchterlon vuonna 1948, ja sitä on sittemmin käytetty laajalti antigeenien ja vasta-aineiden vuorovaikutuksen analysointiin.

Menetelmän pääperiaate on havaita saostumisreaktio, joka tapahtuu antigeenien ja vasta-aineiden vuorovaikutuksessa agaroosi- tai agargeelissä. Tämän reaktion tulokset visualisoidaan saostumisviivoina, jotka muodostuvat antigeenien ja vasta-aineiden väliselle kontaktivyöhykkeelle.

Ouchterlonue-menetelmään kuuluu useita keskeisiä vaiheita. Ensin kaadetaan agaroosi tai agargeeli tasaiselle pinnalle ja muodostuu kuoppia. Eri antigeenejä ja vasta-aineita lisätään sitten jokaiseen kuoppaan testausta varten. Inkuboinnin jälkeen geelissä tapahtuu antigeenien ja vasta-aineiden kulkeutumista, ja jos niiden välillä tapahtuu vuorovaikutusta, muodostuu saostumislinjoja. Tulokset analysoidaan sitten käyttämällä kuvantamistekniikoita, kuten värjäystä tai immunohistokemiaa.

Ouchterlon-menetelmällä on useita etuja, jotka tekevät siitä hyödyllisen työkalun tutkimuksessa ja diagnostiikassa.

Ouchterlonny-menetelmä

Craig Moulton 4. huhtikuuta 2018

Ouchterlon-menetelmä on ranskalaisen immunologin Jean Lecan ja japanilaisen mikrobiologi Tetsu Uchidan vuonna 53 ehdottama yleinen immunologinen testi. Se perustuu hemolysiiniantigeenien tai toksiinien reaktioihin vasta-aineiden kanssa. Tätä menetelmää käytetään sairauksien, kuten AIDSin, havaitsemiseen. Sitä käytetään yleensä valmistelevana menetelmänä toiselle immuunijärjestelmätestille, kuten mycobacterium tuberculosis ja leprabakteerille. Spitaalibakteerien ja vasta-aineen, joka tunnetaan myös nimellä epitopaostumia, välinen reaktio, joka tunnistetaan immunisoimalla kaneissa, saa erityyppiset leprabakteerit agglutinoitumaan, mikä tekee niistä helposti erotettavissa. Vaikka laboratoriotulokset voidaan ilmaista tällaisten sairauksien vasta-ainetitterin nousuna tai laskuna, näillä termeillä ei silti ole tarkkaa merkitystä.

Tämän tutkimusmenetelmän saamiseksi Leka kokeili lampaalla ja sen immuunivasteella bakteerien, virusten ja muiden mikrobien tartunta-aineille. Japanilaiset tutkijat suorittivat sitten tutkimuksen nähdäkseen, oliko menetelmä vakaa eri kaneissa, ja havaitsivat korkeamman tarkkuuden monissa laboratoriomenetelmissä. Sitten he havaitsivat, että joidenkin immuunitekijöiden tasot voidaan havaita herkimmällä menetelmällä. Suoritettuaan sarjan kokeita Ouchtoralona kehitti tämän tekniikan kvantifioidakseen, milloin immuunijärjestelmään injektoidaan antigeeni.