Immunodiffusie is een methode om twee of meer oplossingen te scheiden, deze op papier aan te brengen, te mengen en tegelijkertijd alle oplossingen langzaam door elkaar te laten gaan.
De essentie van de methode is als volgt: een mengsel van opgeloste stoffen in verschillende reageerbuisjes wordt op een strook filtreerpapier of -plaat geplaatst. Het andere uiteinde wordt in een zuiger gestoken met een rubberen buis, verbonden door een glazen buis, om de resulterende oplossingen vrij te geven. Beide uiteinden zijn verbonden door een rubberen buis en het vrije uiteinde wordt enkele centimeters ondergedompeld in een glas met een verdunde antigeenoplossing. Het op deze manier gegoten mengsel wordt op een houten frame geplaatst - een draad gebogen in een boog van 8-10 cm. Voeg na het verwijderen van overtollige vloeistof uit de buis en buis dezelfde hoeveelheid wasoplossing toe (water, zoutoplossing of buffervloeistof ), herhaal dit 3-4 keer en voer ultrafiltratie uit om de resterende immunoglobulinen uit de oplossing te verwijderen. Breng vervolgens door een druppel van het mengsel, gedroogd op filtreerpapier, een suspensie van pigment 2 aan, gevormd na toevoeging van 0,5 ml geconcentreerd salpeterzuur aan een droog mengsel bestaande uit 5 mg glycine, 1 mg methylblauw en 1 ml 2% calciumchloride-oplossing. Na het drogen ontstaat er een witte pigmentvlek. Het wordt met de punt van een naald door twee paar platen gevoerd die het mengsel bevatten, waardoor de twee reeksen van deze gepigmenteerde vlekken worden gemengd en het pigment gelijkmatig wordt verdeeld zonder tussenliggende grenzen ertussen en er vlekken worden gevormd.