Immunodyfuzja

Immunodyfuzja to metoda rozdzielania dwóch lub więcej roztworów, a także nanoszenia ich na papier, mieszania i jednoczesnego powolnego przepuszczania wszystkich roztworów przez siebie.

Istota metody jest następująca: mieszaninę rozpuszczonych substancji w różnych probówkach umieszcza się na pasku bibuły lub płytki filtracyjnej. Drugi koniec wprowadza się do tłoka z gumową rurką, połączoną szklaną rurką w celu uwolnienia powstałych roztworów. Obydwa końce łączy się gumową rurką, a jej wolny koniec zanurza się na kilka centymetrów w szklance z rozcieńczonym roztworem antygenu. Tak wylaną mieszaninę umieszcza się na drewnianej ramie - drucie zagiętym w łuk o długości 8-10 cm, po usunięciu nadmiaru płynu z rurki i rurki dodaje się taką samą ilość roztworu płuczącego (woda, roztwór soli lub płyn buforowy ), powtórzyć 3-4 razy i przeprowadzić ultrafiltrację w celu usunięcia z roztworu pozostałych immunoglobulin. Następnie przez kroplę mieszaniny wysuszoną na bibule filtracyjnej nanieść zawiesinę pigmentu 2 powstałą po dodaniu 0,5 ml stężonego kwasu azotowego do suchej mieszaniny składającej się z 5 mg glicyny, 1 mg błękitu metylowego i 1 ml 2% roztwór chlorku wapnia. Po wyschnięciu tworzy się biała plama pigmentacyjna. Przechodzi ona czubkiem igły przez dwie pary płytek zawierających mieszaninę, dzięki czemu obie serie tych zabarwionych plamek mieszają się, a pigment jest równomiernie rozprowadzany bez pośrednich granic między nimi i powstają plamy