Mikroskopia świetlna to metoda badania mikrostruktur i małych obiektów, w której powiększony obraz uzyskuje się za pomocą przyrządu optycznego – mikroskopu. Metoda ta jest szeroko stosowana w różnych dziedzinach nauki i techniki, m.in. w biologii, medycynie, chemii, materiałoznawstwie i innych.
Zasada działania mikroskopii świetlnej opiera się na wykorzystaniu promieniowania świetlnego do stworzenia obrazu obiektu. Światło przechodzi przez soczewkę mikroskopu i skupia się na przedmiocie znajdującym się na szklanym szkiełku. Światło następnie odbija się od obiektu i uderza w element światłoczuły – kliszę fotograficzną lub czujnik cyfrowy. Po przetworzeniu obrazu na komputerze można uzyskać powiększony obraz obiektu.
Jedną z głównych zalet mikroskopii świetlnej jest jej wysoka rozdzielczość. Oznacza to, że mikroskop świetlny może badać obiekty z bardzo dużą szczegółowością, aż do pojedynczych cząsteczek. Ponadto metoda ta pozwala na badanie obiektów żywych, takich jak komórki i bakterie, w ich naturalnym środowisku.
Mikroskop świetlny ma jednak pewne ograniczenia. Nie można go używać na przykład do badania obiektów przezroczystych, takich jak kryształy czy szkło. Nie nadaje się również do badania obiektów, które nie odbijają światła, takich jak metale lub niektóre związki organiczne.
Ogólnie rzecz biorąc, mikroskopia świetlna jest ważnym narzędziem do badania mikroświata, które pozwala badać obiekty na różnych poziomach organizacji. Ze względu na wysoką rozdzielczość metoda ta jest szeroko stosowana w badaniach naukowych, medycynie i innych dziedzinach.
Mikroskopia świetlna (LMS) to metoda mikroskopowa polegająca na wykorzystaniu światła do uzyskania powiększonego obrazu badanego obiektu. Metoda ta jest szeroko stosowana w różnych dziedzinach nauki i techniki, takich jak biologia, medycyna, chemia, fizyka i inne.
Zasada działania M. s. opiera się na fakcie, że światło przechodzące przez obiekt badań ulega rozproszeniu i załamaniu na jego powierzchni. Specjalne urządzenie optyczne – mikroskop – zbiera rozproszone światło i kieruje je do elementu światłoczułego, gdzie energia świetlna zamieniana jest na sygnał elektryczny. Powstały obraz można przekształcić do postaci elektronicznej, a następnie poddać analizie za pomocą specjalnych programów.
SM. ma wiele zalet w porównaniu z innymi metodami mikroskopowymi. Pozwala na uzyskanie bardzo dużego powiększenia obrazu, nawet kilkudziesięciu tysięcy razy. Ponadto pani S. jest bezkontaktową metodą badawczą, która pozwala uniknąć uszkodzenia obiektu badań.
Jednakże, M. S. ma też swoje wady. Wymaga na przykład użycia specjalnych przyrządów optycznych i elementów światłoczułych, co może być kosztowne. Ponadto jakość obrazu zależy od wielu czynników, takich jak jakość mikroskopu, oświetlenie, rozmiar i kształt badanego obiektu itp.
Ogólnie rzecz biorąc, pani S. pozostaje jedną z najpowszechniejszych technik mikroskopowych ze względu na swoją prostotę, dokładność i dostępność.
Mikroskopia świetlna
Mikroskopia świetlna jest metodą badawczą polegającą na wykorzystaniu światła do uzyskania powiększonego obrazu obiektów. Metoda ta jest szeroko stosowana w różnych dziedzinach, takich jak biologia, medycyna, inżynieria materiałowa i inne.
Jak działa mikroskopia świetlna
Mikroskopy świetlne działają w oparciu o zjawisko dyfrakcji – zjawisko rozpraszania światła podczas przejścia przez małe otwory w przeszkodzie. W przypadku mikroskopii świetlnej powiększony obraz obiektu uzyskuje się przepuszczając światło przez bardzo cienkie próbki, które muszą być optycznie przezroczyste. Źródłem światła jest lampa, a soczewką mikroskopu jest soczewka znajdująca się w pewnej odległości od próbki. Obiekt ustawia się tak, aby jego obraz skupiał się na płaszczyźnie soczewki.
Wszystkie badania mikroskopowe dzielą się na trzy grupy metod - mikroskopię świetlną, elektronową i sił atomowych. Wszystkie opierają się na wymiarach mikroskali i można je podzielić na jakościowe, półilościowe i ilościowe. Metody te umożliwiają analizę struktury atomowej materiałów, struktury molekularnej leków i białek, struktury komórek drobnoustrojów i wiele innych.
**Mikroskopia świetlna** może być widzialna (optyczna), luminescencyjna i polaryzacyjna. Zaletami są niski koszt analizatorów i duża liczba detektorów oraz łatwość zarządzania. Główne wady: słaba stabilność temperaturowa i szum sygnału z detektora. Mikroskopia widzialna (optyczna) pozwala na badanie struktur dwuwymiarowych w próbkach. Ze względu na zastosowanie małych, punktowych źródeł światła nazywana jest także mikroskopią koherentną lub sondującą. Obejmuje to mikroskopię optyczną z odwróconą sondą (brazylijską). Jest stosowany w biologii, medycynie i inżynierii. Technika jest bardzo dokładna, można uzyskać wiarygodne dane, ale proces jest pracochłonny. Za pomocą tej metody możliwe staje się określenie składu chemicznego materiału; oceniać parametry mechaniczne obiektów; analizować stany powierzchni i ich granice. Ważne jest, aby za pomocą tej techniki możliwe było prowadzenie obserwacji wizualnych obiektów dynamicznych.
Mikroskopia luminescencyjna – podczas procesu koagulacji wyładowania elektrycznego oświetlany jest blask atomów, cząsteczek i jonów. Ta technika technologiczna służy do wizualizacji świetlnej procesów metabolicznych i różnych związków chemicznych. Pozwala prześledzić dynamikę reakcji i zmienić charakter impulsów. Na podstawie tekstury blasku obiektów biologicznych można określić czynniki stresowe i patologię genów. Metoda ta jest z powodzeniem stosowana do wykrywania mikroorganizmów. Intensywność blasku można wykorzystać do oceny stanu fizjologicznego zwierząt doświadczalnych. Mikroskopia luminescencyjna uznawana jest za najtańsze narzędzie umożliwiające szybką analizę stanu organizmu. Różne części widma światła wywierają różny wpływ na żywą komórkę. Jeśli wybierzesz taki, który emituje określone cząsteczki wzbudzone w określonych warunkach. Po pewnym czasie staje się jasne, jakie reakcje zachodzą i jak zmieni się komórka po napromienianiu. Metoda ta charakteryzuje się łatwością wykonania i dokładnością, a przy tym zajmuje niewiele czasu.