Polymeraskedjereaktion (PCR) är en av de mest använda metoderna inom molekylär genetik. Denna metod möjliggör mycket känslig förstoring av DNA-molekylen som är nödvändig för genetisk analys.
Principen för PCR är att upprepade gånger öka mängden av en specifik DNA-sekvens med hjälp av ett speciellt enzym - termostabilt DNA-polymeras. PCR-processen består av tre huvudsteg: denaturering, hybridisering och förlängning.
I det första steget av denatureringen värms DNA upp till en hög temperatur, vilket gör att den dubbelsträngade DNA-strukturen bryts isär i två separata strängar. I det andra hybridiseringssteget sänks temperaturen och speciella korta, enkelsträngade molekyler som kallas primers binder till de specifika regioner av DNA som behöver amplifieras. I det tredje steget av förlängning syntetiserar DNA-polymeras nya DNA-strängar med hjälp av primrar som utgångspunkter. Denna process upprepas flera gånger, vilket resulterar i en exponentiell ökning av antalet kopior av den ursprungliga DNA-sekvensen.
PCR är en mycket känslig metod och kan detektera mycket små mängder DNA i prover. Detta gör det till ett mycket användbart verktyg för att diagnostisera genetiska sjukdomar som ärftliga sjukdomar, cancer och infektionssjukdomar som humant papillomvirus.
Ett exempel på användning av PCR i diagnostik är pre-implantationsdiagnostik, som gör det möjligt att fastställa förekomsten av genetiska störningar i ett embryo innan det implanteras i livmodern. Denna metod låter dig undvika att ha ett barn med genetiska störningar.
PCR används också för att identifiera virus i vävnader. Till exempel kan humant papillomvirus detekteras med PCR i cervikala utstryk. Denna metod har hög känslighet och specificitet, vilket gör att du kan exakt bestämma närvaron av viruset.
Sammanfattningsvis är PCR ett mycket kraftfullt verktyg inom molekylär genetik och har ett brett spektrum av tillämpningar vid diagnos av genetiska sjukdomar och identifiering av virus. Tack vare sin höga känslighet låter PCR dig få snabba och exakta resultat.
Polymeraskedjereaktionen (PCR) är en mycket känslig metod som används inom molekylär genetik. Det består av att stimulera processen med multipla DNA-syntes i en enda cell med hjälp av polymerasenzymer, vilket gör det möjligt att erhålla det erforderliga antalet DNA-molekyler för vidare genetisk analys.
Denna metod används i stor utsträckning vid preimplantationsdiagnostik av olika genetiska sjukdomar och störningar, såväl som för att identifiera virus i biologiska vävnader. Till exempel kan polymeraskedjereaktion (PCR) användas för att detektera humant papillomvirus (HPV) i ett cervikalt utstryk.
För att utföra en polymeraskedjereaktion är det nödvändigt att använda speciella primers som fungerar som en "primer" för DNA-syntes. Primers väljs för att matcha specifika regioner av DNA som behöver detekteras i provet. En blandning bestående av enzymer, nukleotider och andra komponenter nödvändiga för DNA-syntes tillsätts sedan till provet.
Under reaktionen delas DNA-molekylen upprepade gånger, vilket leder till en ökning av antalet DNA-molekyler och en ökning av analysens känslighet. Som ett resultat av reaktionen kan många kopior av DNA-regionen av intresse erhållas, som kan användas för ytterligare analys.