Polymerázová řetězová reakce (Pcr)

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je jednou z nejpoužívanějších metod v molekulární genetice. Tato metoda umožňuje vysoce citlivé zvětšení molekuly DNA nezbytné pro genetickou analýzu.

Principem PCR je opakované navyšování množství specifické sekvence DNA pomocí speciálního enzymu – termostabilní DNA polymerázy. Proces PCR se skládá ze tří hlavních kroků: denaturace, žíhání a elongace.

V prvním kroku denaturace se DNA zahřeje na vysokou teplotu, což způsobí, že se struktura dvouvláknové DNA rozpadne na dvě samostatná vlákna. Ve druhém kroku nasedání se teplota sníží a speciální krátké jednovláknové molekuly zvané primery se navážou na specifické oblasti DNA, které je třeba amplifikovat. Ve třetím kroku elongace syntetizuje DNA polymeráza nová vlákna DNA pomocí primerů jako výchozích bodů. Tento proces se několikrát opakuje, což má za následek exponenciální nárůst počtu kopií původní sekvence DNA.

PCR je velmi citlivá metoda a dokáže detekovat velmi malá množství DNA ve vzorcích. Díky tomu je velmi užitečným nástrojem při diagnostice genetických onemocnění, jako jsou dědičné choroby, rakovina a infekční onemocnění, jako je lidský papilomavirus.

Jedním z příkladů využití PCR v diagnostice je preimplantační diagnostika, která umožňuje určit přítomnost genetických poruch u embrya před jeho implantací do dělohy. Tato metoda vám umožňuje vyhnout se narození dítěte s genetickými poruchami.

PCR se také používá k identifikaci virů v tkáních. Například lidský papilomavirus lze detekovat pomocí PCR v cervikálních nátěrech. Tato metoda má vysokou citlivost a specificitu, což umožňuje přesně určit přítomnost viru.

Závěrem lze říci, že PCR je velmi mocný nástroj v molekulární genetice a má širokou škálu aplikací v diagnostice genetických onemocnění a identifikaci virů. Díky své vysoké citlivosti vám PCR umožňuje získat rychlé a přesné výsledky.

Polymerázová řetězová reakce (PCR) je vysoce citlivá metoda používaná v molekulární genetice. Spočívá ve stimulaci procesu vícenásobné syntézy DNA v jedné buňce pomocí polymerázových enzymů, což umožňuje získat potřebný počet molekul DNA pro další genetickou analýzu.

Tato metoda je široce používána v preimplantační diagnostice různých genetických onemocnění a poruch, stejně jako pro identifikaci virů v biologických tkáních. Například polymerázová řetězová reakce (PCR) může být použita k detekci lidského papilomaviru (HPV) v cervikálním nátěru.

K provedení polymerázové řetězové reakce je nutné použít speciální primery, které slouží jako „primer“ pro syntézu DNA. Primery se vybírají tak, aby odpovídaly specifickým oblastem DNA, které je třeba ve vzorku detekovat. Ke vzorku se poté přidá směs skládající se z enzymů, nukleotidů a dalších složek nezbytných pro syntézu DNA.

Během reakce dochází k opakovanému dělení molekuly DNA, což vede ke zvýšení počtu molekul DNA a zvýšení citlivosti analýzy. V důsledku reakce lze získat mnoho kopií požadované oblasti DNA, které lze použít pro další analýzu.