Polimeraza Zəncirvari Reaksiya (Pcr)

Polimeraza Zəncirvari Reaksiya (PZR) molekulyar genetikada ən çox istifadə edilən üsullardan biridir. Bu üsul genetik analiz üçün lazım olan DNT molekulunu yüksək həssaslıqla böyütməyə imkan verir.

PCR prinsipi xüsusi bir fermentdən - termostabil DNT polimerazasından istifadə edərək müəyyən bir DNT ardıcıllığının miqdarını dəfələrlə artırmaqdır. PCR prosesi üç əsas mərhələdən ibarətdir: denatürasiya, yumşalma və uzanma.

Denatürasiyanın ilk pilləsində DNT yüksək temperatura qədər qızdırılır ki, bu da ikiqat zəncirli DNT strukturunun iki ayrı zəncirdə parçalanmasına səbəb olur. İkinci yumşalma mərhələsində temperatur aşağı salınır və primerlər adlanan xüsusi qısa, tək zəncirli molekullar gücləndirilməli olan DNT-nin xüsusi bölgələrinə bağlanır. Uzatmanın üçüncü pilləsində DNT polimeraza başlanğıc nöqtələri kimi primerlərdən istifadə edərək yeni DNT zəncirlərini sintez edir. Bu proses bir neçə dəfə təkrarlanır və nəticədə orijinal DNT ardıcıllığının nüsxələrinin sayında eksponensial artım olur.

PCR çox həssas bir üsuldur və nümunələrdə çox az miqdarda DNT aşkar edə bilir. Bu, onu irsi xəstəliklər, xərçəng və insan papillomavirusu kimi yoluxucu xəstəliklər kimi genetik xəstəliklərin diaqnostikasında çox faydalı vasitədir.

Diaqnostikada PCR-nin istifadəsinə bir nümunə, uterusa implantasiya edilməzdən əvvəl bir embrionda genetik pozğunluqların mövcudluğunu müəyyən etməyə imkan verən preimplantasiya diaqnostikasıdır. Bu üsul genetik pozğunluğu olan uşaq sahibi olmaqdan qaçmağa imkan verir.

PCR də toxumalarda virusları müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Məsələn, insan papillomavirusu uşaqlıq boynu yaxmalarında PCR ilə aşkar edilə bilər. Bu üsul yüksək həssaslığa və spesifikliyə malikdir, bu da virusun varlığını dəqiq müəyyən etməyə imkan verir.

Yekun olaraq qeyd edək ki, PCR molekulyar genetikada çox güclü vasitədir və genetik xəstəliklərin diaqnostikasında və virusların identifikasiyasında geniş tətbiq sahəsinə malikdir. Yüksək həssaslığına görə PCR tez və dəqiq nəticələr əldə etməyə imkan verir.

Polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR) molekulyar genetikada istifadə olunan çox həssas bir üsuldur. O, polimeraza fermentlərindən istifadə edərək bir hüceyrədə çoxsaylı DNT sintezi prosesinin stimullaşdırılmasından ibarətdir ki, bu da sonrakı genetik analiz üçün lazımi sayda DNT molekulunu əldə etməyə imkan verir.

Bu üsul müxtəlif genetik xəstəliklərin və pozğunluqların preimplantasiya diaqnostikasında, həmçinin bioloji toxumalarda virusların müəyyən edilməsində geniş istifadə olunur. Məsələn, servikal yaxmada insan papillomavirusunu (HPV) aşkar etmək üçün polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR) istifadə edilə bilər.

Polimeraza zəncirvari reaksiyanı həyata keçirmək üçün DNT sintezi üçün "primer" kimi xidmət edən xüsusi primerlərdən istifadə etmək lazımdır. Primerlər nümunədə aşkar edilməli olan DNT-nin xüsusi bölgələrinə uyğun olmaq üçün seçilir. Daha sonra nümunəyə fermentlər, nukleotidlər və DNT sintezi üçün lazım olan digər komponentlərdən ibarət qarışıq əlavə edilir.

Reaksiya zamanı DNT molekulu dəfələrlə bölünür ki, bu da DNT molekullarının sayının artmasına və analizin həssaslığının artmasına səbəb olur. Reaksiya nəticəsində maraqlı DNT bölgəsinin bir çox nüsxəsi əldə edilə bilər ki, bu da əlavə analiz üçün istifadə edilə bilər.