Polymerasekjedereaksjon (Pcr)

Polymerase Chain Reaction (PCR) er en av de mest brukte metodene innen molekylær genetikk. Denne metoden tillater svært sensitiv forstørrelse av DNA-molekylet som er nødvendig for genetisk analyse.

Prinsippet for PCR er å gjentatte ganger øke mengden av en spesifikk DNA-sekvens ved å bruke et spesielt enzym - termostabil DNA-polymerase. PCR-prosessen består av tre hovedtrinn: denaturering, annealing og forlengelse.

I det første trinnet med denaturering varmes DNA opp til høy temperatur, noe som fører til at den dobbelttrådete DNA-strukturen brytes fra hverandre i to separate tråder. I det andre annealingstrinnet senkes temperaturen og spesielle korte, enkelttrådede molekyler kalt primere binder seg til de spesifikke områdene av DNA som må amplifiseres. I det tredje trinnet av forlengelsen syntetiserer DNA-polymerase nye DNA-tråder ved å bruke primere som utgangspunkt. Denne prosessen gjentas flere ganger, noe som resulterer i en eksponentiell økning i antall kopier av den originale DNA-sekvensen.

PCR er en svært sensitiv metode og kan påvise svært små mengder DNA i prøver. Dette gjør det til et svært nyttig verktøy for å diagnostisere genetiske sykdommer som arvelige sykdommer, kreft og infeksjonssykdommer som humant papillomavirus.

Et eksempel på bruk av PCR i diagnostikk er pre-implantasjonsdiagnostikk, som gjør det mulig å fastslå tilstedeværelsen av genetiske lidelser i et embryo før det implanteres i livmoren. Denne metoden lar deg unngå å få et barn med genetiske lidelser.

PCR brukes også til å identifisere virus i vev. For eksempel kan humant papillomavirus påvises ved PCR i livmorhalsutstryk. Denne metoden har høy følsomhet og spesifisitet, som lar deg nøyaktig bestemme tilstedeværelsen av viruset.

Avslutningsvis er PCR et meget kraftig verktøy innen molekylær genetikk og har et bredt spekter av bruksområder i diagnostisering av genetiske sykdommer og identifisering av virus. På grunn av sin høye følsomhet lar PCR deg få raske og nøyaktige resultater.

Polymerasekjedereaksjonen (PCR) er en svært sensitiv metode som brukes i molekylær genetikk. Den består i å stimulere prosessen med multiple DNA-syntese i en enkelt celle ved hjelp av polymeraseenzymer, noe som gjør det mulig å oppnå det nødvendige antallet DNA-molekyler for videre genetisk analyse.

Denne metoden er mye brukt i preimplantasjonsdiagnostikk av ulike genetiske sykdommer og lidelser, samt for å identifisere virus i biologisk vev. For eksempel kan polymerasekjedereaksjon (PCR) brukes til å oppdage humant papillomavirus (HPV) i et utstryk av livmorhalsen.

For å utføre en polymerasekjedereaksjon er det nødvendig å bruke spesielle primere som fungerer som en "primer" for DNA-syntese. Primere velges for å matche spesifikke områder av DNA som må påvises i prøven. En blanding bestående av enzymer, nukleotider og andre komponenter som er nødvendige for DNA-syntese tilsettes deretter til prøven.

Under reaksjonen deles DNA-molekylet gjentatte ganger, noe som fører til en økning i antall DNA-molekyler og en økning i sensitiviteten til analysen. Som et resultat av reaksjonen kan mange kopier av DNA-området av interesse oppnås, som kan brukes til videre analyse.