Titr bakteriofága

Titr bakteriofága je důležitým ukazatelem jeho účinnosti v boji proti bakteriálním infekcím. Odráží počet aktivních bakteriofágových jednotek v jednom mililitru fagolyzátu.

Existují dvě hlavní metody pro stanovení titru bakteriofágů:

1. Podle Appelmana. Tato metoda je založena na stanovení maximálního ředění bakteriofágové suspenze, která může způsobit lýzu citlivých bakterií v kapalném médiu. K tomu se zkoumaný materiál umístí do zkumavky s kapalným médiem obsahujícím citlivé bakterie. Poté se fág sériově zředí a přidá do zkumavky s bakteriální kulturou. Po inkubaci po určitou dobu se vyhodnotí výsledky - pokud je pozorována lýza bakterií, pak je titr bakteriofága považován za jistý.

2. Podle Grazie. Tato metoda spočívá ve stanovení počtu negativních kolonií, které se vytvoří z určitého objemu bakteriofágové suspenze, když je kokultivována s citlivými bakteriemi v kapalném médiu. Zkumavky s bakteriální kulturou a testovaným materiálem se umístí na určitou dobu do termostatu. Poté se spočítá počet negativních kolonií a porovná se s titrem bakteriofága pomocí vzorce: počet negativních kolonií = titr bakteriofága x 100.

V závislosti na účelu studie a použitých metodách lze titr bakteriofága stanovit pro jeden kmen bakterií nebo pro několik kmenů. Tento ukazatel je důležitým kritériem při výběru antibakteriální terapie a hodnocení účinnosti léčby bakteriálních infekcí.

V dnešní době jsou bakteriofágy jedním z nejdůležitějších a nejrozšířenějších objektů moderní biologie. Bakteriofágy jsou viry, které mohou infikovat a parazitovat určité bakteriální buňky zvané hostitelé. Jejich role v biochemii se však také stala středem zájmu výzkumu vzhledem k tomu, že mohou být užitečné pro studium procesů spojených s vývojem bakterií. Bakteriální infekce bakteriofilními viry jsou považovány za vícestupňový proces spojený s určitými fázemi růstu hostitele a poškozením cíle.

Titr bakteriofágů lze stanovit různými způsoby a je často jedním z klíčových parametrů studií věnovaných studiu těchto virů. Jednou z metod stanovení jsou titry pomocí Appelmanovy metody, která je založena na použití určitých objemů fágové suspenze podrobené buněčné lýze v kapalném médiu. V tomto případě mohou fágy detekovat lyzační vlastnosti, stejně jako schopnost procházet membránami bakteriálních buněk, aby jimi pronikly a způsobily destrukci buněčné stěny.

Použití Appelmanovy metody navíc umožňuje určit počet fágových částic vytvořených jako výsledek tohoto postupu. Toto je známé jako Apfelmannův titr a lze jej měřit porovnáním velikosti a množství