Titer Bakteriophage

Der Titer eines Bakteriophagen ist ein wichtiger Indikator für seine Wirksamkeit bei der Bekämpfung bakterieller Infektionen. Sie spiegelt die Anzahl aktiver Bakteriophageneinheiten in einem Milliliter Phagolysat wider.

Es gibt zwei Hauptmethoden zur Bestimmung des Bakteriophagentiters:

1. Laut Appelman. Diese Methode basiert auf der Bestimmung der maximalen Verdünnung einer Bakteriophagensuspension, die zur Lyse empfindlicher Bakterien in einem flüssigen Medium führen kann. Dazu wird das zu untersuchende Material in ein Reagenzglas mit einem flüssigen Medium gegeben, das empfindliche Bakterien enthält. Anschließend wird der Phage seriell verdünnt und zusammen mit der Bakterienkultur in das Reagenzglas gegeben. Nach einer gewissen Inkubationszeit werden die Ergebnisse ausgewertet – wird eine Lyse der Bakterien beobachtet, gilt der Titer des Bakteriophagen als sicher.

2. Laut Grazia. Bei dieser Methode wird die Anzahl der negativen Kolonien bestimmt, die sich aus einem bestimmten Volumen einer Bakteriophagensuspension bilden, wenn diese mit empfindlichen Bakterien in einem flüssigen Medium kultiviert wird. Reagenzgläser mit einer Bakterienkultur und dem Testmaterial werden für eine bestimmte Zeit in einen Thermostat gestellt. Dann wird die Anzahl der negativen Kolonien gezählt und mit dem Bakteriophagen-Titer verglichen, wobei die Formel verwendet wird: Anzahl negativer Kolonien = Bakteriophagen-Titer x 100.

Abhängig vom Zweck der Studie und den verwendeten Methoden kann der Bakteriophagentiter für einen Bakterienstamm oder für mehrere Stämme bestimmt werden. Dieser Indikator ist ein wichtiges Kriterium bei der Auswahl einer antibakteriellen Therapie und der Beurteilung der Wirksamkeit der Behandlung bakterieller Infektionen.

Heutzutage sind Bakteriophagen eines der wichtigsten und am besten untersuchten Objekte der modernen Biologie. Bakteriophagen sind Viren, die bestimmte Bakterienzellen, sogenannte Wirte, infizieren und parasitieren können. Ihre Rolle in der Biochemie ist jedoch auch in den Fokus der Forschung gerückt, da sie für die Untersuchung von Prozessen im Zusammenhang mit der Bakterienentwicklung nützlich sein können. Bakterielle Infektionen mit bakteriophilen Viren gelten als mehrstufiger Prozess, der mit bestimmten Stadien des Wirtswachstums und der Schädigung des Ziels verbunden ist.

Der Bakteriophagentiter kann auf verschiedene Weise bestimmt werden und ist häufig einer der Schlüsselparameter in Studien, die sich mit der Untersuchung dieser Viren befassen. Eine der Bestimmungsmethoden sind Titer nach der Appelman-Methode, die auf der Verwendung bestimmter Volumina einer Phagensuspension basiert, die einer Zelllyse in einem flüssigen Medium unterzogen wird. In diesem Fall können Phagen Lyseeigenschaften erkennen sowie die Fähigkeit, die Membranen von Bakterienzellen zu durchdringen, um in diese einzudringen und eine Zerstörung der Zellwand herbeizuführen.

Darüber hinaus ermöglicht die Anwendung der Appelman-Methode die Bestimmung der Anzahl der durch dieses Verfahren gebildeten Phagenpartikel. Dieser wird als Apfelmann-Titer bezeichnet und kann durch Vergleich von Größe und Menge gemessen werden