Titteri Bakteriofagi

Bakteriofagin tiitteri on tärkeä indikaattori sen tehokkuudesta bakteeri-infektioiden torjunnassa. Se kuvastaa aktiivisten bakteriofagiyksiköiden lukumäärää yhdessä millilitrassa fagolysaattia.

Bakteriofagitiitterin määrittämiseen on kaksi päämenetelmää:

1. Appelmanin mukaan. Tämä menetelmä perustuu bakteriofagisuspension maksimilaimennukseen, joka voi aiheuttaa herkkien bakteerien hajoamisen nestemäisessä väliaineessa. Tätä varten tutkittava materiaali asetetaan koeputkeen, jossa on herkkiä bakteereja sisältävää nestemäistä väliainetta. Sitten faagi sarjalaimennetaan ja lisätään koeputkeen bakteeriviljelmän kanssa. Tietyn ajan inkuboinnin jälkeen tulokset arvioidaan - jos havaitaan bakteerien hajoamista, bakteriofagin tiitteriä pidetään varmana.

2. Grazian mukaan. Tämä menetelmä koostuu negatiivisten pesäkkeiden lukumäärän määrittämisestä, jotka muodostuvat tietystä tilavuudesta bakteriofagisuspensiota, kun sitä viljellään yhdessä herkkien bakteerien kanssa nestemäisessä alustassa. Koeputket, joissa on bakteeriviljelmää ja testimateriaalia, asetetaan termostaattiin tietyksi ajaksi. Sitten negatiivisten pesäkkeiden lukumäärä lasketaan ja sitä verrataan bakteriofagitiitteriin käyttämällä kaavaa: negatiivisten pesäkkeiden lukumäärä = bakteriofagitiitteri x 100.

Tutkimuksen tarkoituksesta ja käytetyistä menetelmistä riippuen bakteriofagitiitteri voidaan määrittää yhdelle bakteerikannalle tai usealle bakteerikannalle. Tämä indikaattori on tärkeä kriteeri valittaessa antibakteerista hoitoa ja arvioitaessa bakteeri-infektioiden hoidon tehokkuutta.

Nykyään bakteriofagit ovat yksi tärkeimmistä ja laajimmin tutkituista modernin biologian objekteista. Bakteriofagit ovat viruksia, jotka voivat infektoida ja loistaa tiettyjä bakteerisoluja, joita kutsutaan isänniksi. Niiden rooli biokemiassa on kuitenkin noussut myös tutkimuksen painopisteeseen, koska niistä voi olla hyötyä bakteerien kehitykseen liittyvien prosessien tutkimisessa. Bakteriofiilisten virusten aiheuttamien bakteeri-infektioiden katsotaan olevan monivaiheinen prosessi, joka liittyy tiettyihin isännän kasvuvaiheisiin ja kohdevaurioon.

Bakteriofagien tiitteri voidaan määrittää eri tavoin, ja se on usein yksi avainparametreista näiden virusten tutkimukselle omistetuissa tutkimuksissa. Yksi määritysmenetelmistä on tiitterit Appelman-menetelmällä, joka perustuu tiettyjen tilavuuksien käyttöön solulyysillä nestemäisessä väliaineessa. Tässä tapauksessa faagit voivat havaita hajoamisominaisuudet sekä kyvyn kulkea bakteerisolujen kalvojen läpi tunkeutuakseen niihin ja aiheuttaakseen soluseinän tuhoutumisen.

Lisäksi Appelmanin menetelmän käyttö mahdollistaa tämän menettelyn tuloksena muodostuneiden faagipartikkelien lukumäärän määrittämisen. Tätä kutsutaan Apfelmann-tiitteriksi ja se voidaan mitata vertaamalla kokoa ja määrää