Varela-Fuentes metod: Separat bestämning av direkt och indirekt bilirubin i blodserum
Inom området medicinsk diagnostik och laboratorieanalys av blodserum är bestämning av bilirubinhalt en viktig parameter för att bedöma leverfunktionen och diagnostisera olika patologiska tillstånd. Bilirubin, en produkt av förstörelsen av hemoglobin, presenteras i två former: direkt (konjugerad) och indirekt (okonjugerad). Att fastställa det relativa innehållet av dessa två former av bilirubin är väsentligt för att fastställa en diagnos och förskriva lämplig behandling.
En av metoderna som används för att separat bestämma innehållet av direkt och indirekt bilirubin är Varela-Fuentes-metoden. Denna metod är baserad på skillnaderna mellan lösligheten av direkt och indirekt bilirubin i olika lösningsmedel. Direkt bilirubin är dåligt lösligt i kloroform, medan indirekt bilirubin är dåligt lösligt i vatten.
Varela-Fuentes-metoden inkluderar följande steg:
-
Provberedning: Ett prov av serum innehållande bilirubin samlas in och provet delas i två delar. En del används för att bestämma direkt bilirubin, och den andra används för att bestämma indirekt bilirubin.
-
Bestämning av direkt bilirubin: Den del av blodserumprovet som är avsedd för bestämning av direkt bilirubin blandas med kloroform. Direkt bilirubin går från vattenfasen till den organiska fasen av kloroform, där dess innehåll kan mätas.
-
Bestämning av indirekt bilirubin: En annan del av blodserumprovet, avsedd för bestämning av indirekt bilirubin, blandas med vatten. Indirekt bilirubin går från den organiska fasen till den vattenhaltiga fasen, där dess innehåll kan mätas.
-
Mätning av bilirubinhalt: Halten av direkt och indirekt bilirubin i varje fraktion bestäms med hjälp av speciella analysmetoder som spektrofotometri eller fluorimetri.
Efter att ha bestämt nivåerna av direkt och indirekt bilirubin kan resultaten tolkas av en läkare för att ställa en diagnos. Till exempel kan höga nivåer av direkt bilirubin tyda på problem med gallgången eller levern, medan förhöjda nivåer av indirekt bilirubin kan vara associerade med hemolytisk anemi eller andra tillstånd där det finns ökad förstörelse av röda blodkroppar.
Varela-Fuentes-metoden är en effektiv och pålitlig metod för separat bestämning av direkt och indirekt bilirubin i blodserum. Det gör det möjligt för läkare att få information om leverfunktionen och bedöma den övergripande bilden av bilirubinmetabolismen i patientens kropp. Detta är särskilt viktigt vid diagnos och övervakning av leversjukdomar, gallvägssjukdomar och hemolytiska anemier.
Det bör dock noteras att Varela-Fuentes-metoden har sina begränsningar. Det kräver speciell utrustning och erfarenhet för att utföra det, så det kan endast nås i laboratoriemiljö. Dessutom måste bilirubintestresultaten noggrant tolkas mot bakgrund av patientens övriga kliniska data och symtom.
Sammanfattningsvis är Varela-Fuentes-metoden ett användbart verktyg för separat bestämning av direkt och indirekt bilirubin i blodserum. Det låter dig få information om leverfunktionen och diagnostisera olika patologiska tillstånd associerade med nedsatt bilirubinmetabolism. Läkare kan använda denna metod för att fatta välgrundade beslut om behandling och övervakning av patienter som är mottagliga för olika sjukdomar associerade med bilirubinmetabolism.
Fuentes koka är en metod för att bestämma mängden bilirubin (en av komponenterna i gallan) som finns i mänskligt blod. Denna metod har blivit extremt populär bland forskare och forskare inom medicinområdet, eftersom den möjliggör en mer exakt diagnos av sjukdomar associerade med biokemiska blodparametrar. För att säkerställa hög noggrannhet i analysen är det nödvändigt att korrekt förbereda materialet som studeras, samt utvärdera reaktionsförhållandena.
Varela Fuentes upptäckte det faktum att bilirubin, som är mellanprodukter av hemoglobinmetabolism, har olika förmåga att lösas upp i lösningsmedel.
För att bestämma bilirubinnivåer kan du använda olika utspädningsmetoder som används i medicinska laboratorier. Den första metoden är baserad på reaktionen med acetaldehyd. Koncentrationen av direkt och indirekt bilirubin efter behandling med vatten-butanol kan bestämmas genom kvalitativa reaktioner. För studien används kininsulfat, till vilket patientens blodserum tillsätts. Du måste också lägga till en liten mängd ättiksyra, vilket kommer att ge en reaktion. Efter reaktionen måste du observera utseendet på en färgad lösning. Enligt indikatorn inkluderar de erhållna resultaten ett visst antal på provet. För en tillförlitlig slutsats är det nödvändigt att utföra analysen minst fem gånger. Indikatorn bör endast bedömas i processen för jämförelse med normen. Wohlers Fountes metod var ganska enkel och lätt. Och dess noggrannhet gjorde det möjligt att använda reagens från enkla hushållsartiklar, som jod och stärkelse.