Varela-Fuentes módszer: A direkt és indirekt bilirubin elkülönített meghatározása a vérszérumban
Az orvosi diagnosztika és a vérszérum laboratóriumi analízise területén a bilirubintartalom meghatározása fontos paraméter a májfunkció értékelésében és a különböző kóros állapotok diagnosztizálásában. A bilirubin, a hemoglobin lebomlásának terméke, két formában jelenik meg: közvetlen (konjugált) és közvetett (konjugálatlan). E két bilirubinforma relatív tartalmának meghatározása elengedhetetlen a diagnózis felállításához és a megfelelő kezelés felírásához.
A direkt és indirekt bilirubin tartalmának elkülönített meghatározásának egyik módszere a Varela-Fuentes módszer. Ez a módszer a direkt és indirekt bilirubin különböző oldószerekben való oldhatósága közötti különbségeken alapul. A direkt bilirubin rosszul oldódik kloroformban, míg az indirekt bilirubin rosszul oldódik vízben.
A Varela-Fuentes módszer eljárása a következő lépéseket tartalmazza:
-
Minta előkészítés: bilirubint tartalmazó szérummintát veszünk, és a mintát két részre osztjuk. Az egyik rész a direkt bilirubin meghatározására szolgál, a másik pedig az indirekt bilirubin meghatározására.
-
Direkt bilirubin meghatározása: A vérszérumminta direkt bilirubin meghatározására szánt részét kloroformmal keverjük össze. A közvetlen bilirubin a vizes fázisból a kloroform szerves fázisába kerül, ahol mérhető a tartalma.
-
Indirekt bilirubin meghatározása: A vérszérumminta egy másik részét, amely az indirekt bilirubin meghatározására szolgál, vízzel keverjük össze. Az indirekt bilirubin a szerves fázisból a vizes fázisba kerül, ahol mérhető a tartalma.
-
Bilirubintartalom mérése: Az egyes frakciók direkt és indirekt bilirubintartalmát speciális analitikai módszerekkel, például spektrofotometriával vagy fluorimetriával határozzák meg.
A direkt és indirekt bilirubin szintjének meghatározása után az eredményeket az orvos értelmezheti a diagnózis felállításához. Például a direkt bilirubin magas szintje epevezeték- vagy májproblémákat jelezhet, míg az indirekt bilirubin emelkedett szintje hemolitikus anémiával vagy más olyan állapotokkal járhat, amelyekben a vörösvértestek fokozott pusztulása következik be.
A Varela-Fuentes módszer hatékony és megbízható módszer a vérszérumban a direkt és indirekt bilirubin külön-külön történő meghatározására. Lehetővé teszi az orvosok számára, hogy információkat szerezzenek a májműködésről, és felmérjék a bilirubin metabolizmusának általános képét a beteg szervezetében. Ez különösen fontos a májbetegségek, az epeúti betegségek és a hemolitikus anémiák diagnosztizálásában és monitorozásában.
Meg kell azonban jegyezni, hogy a Varela-Fuentes módszernek megvannak a korlátai. Végrehajtása speciális felszerelést és tapasztalatot igényel, ezért csak laboratóriumi körülmények között férhet hozzá. Ezenkívül a bilirubin teszt eredményeit gondosan kell értelmezni a beteg egyéb klinikai adataival és tüneteivel összefüggésben.
Összefoglalva, a Varela-Fuentes módszer hasznos eszköz a vérszérum direkt és indirekt bilirubinjának külön-külön történő meghatározására. Lehetővé teszi, hogy információkat szerezzen a májműködésről, és diagnosztizáljon különféle kóros állapotokat, amelyek a bilirubin metabolizmusának károsodásához kapcsolódnak. Az orvosok ezzel a módszerrel megalapozott döntéseket hozhatnak a bilirubin anyagcserével összefüggő különféle betegségekre fogékony betegek kezelésével és monitorozásával kapcsolatban.
A Fuentes-forralás egy módszer az emberi vérben található bilirubin (az epe egyik összetevője) mennyiségének meghatározására. Ez a módszer rendkívül népszerűvé vált az orvostudomány kutatói és tudósai körében, mivel lehetővé teszi a biokémiai vérparaméterekkel összefüggő betegségek pontosabb diagnosztizálását. Az elemzés nagy pontosságának biztosítása érdekében szükséges a vizsgált anyag megfelelő előkészítése, valamint a reakciókörülmények értékelése.
Varela Fuentes felfedezte azt a tényt, hogy a bilirubinok, amelyek a hemoglobin anyagcsere közbenső termékei, különböző mértékben oldódnak fel az oldószerekben.
A bilirubinszint meghatározásához különböző, az orvosi laboratóriumokban használt hígítási módszereket használhatja. Az első módszer acetaldehiddel való reakción alapul. A direkt és indirekt bilirubin koncentrációja víz-butanollal végzett kezelés után kvalitatív reakciókkal határozható meg. A vizsgálathoz kinin-szulfátot használnak, amelyhez a páciens vérszérumát adják. Kis mennyiségű ecetsavat is hozzá kell adni, ami reakciót ad. A reakció után meg kell figyelni a színes oldat megjelenését. A mutató szerint a kapott eredmények bizonyos számot tartalmaznak a mintán. A megbízható következtetés érdekében az elemzést legalább ötször el kell végezni. A mutatót csak a normával való összehasonlítás során kell értékelni. Wohlers Fountes módszere meglehetősen egyszerű és könnyű volt. Pontossága pedig lehetővé tette egyszerű háztartási cikkekből, például jódból és keményítőből származó reagensek használatát.