Μέθοδος Varela-Fuentes: Ξεχωριστός προσδιορισμός άμεσης και έμμεσης χολερυθρίνης στον ορό αίματος
Στον τομέα της ιατρικής διάγνωσης και της εργαστηριακής ανάλυσης ορού αίματος, ο προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε χολερυθρίνη είναι μια σημαντική παράμετρος για την αξιολόγηση της ηπατικής λειτουργίας και τη διάγνωση διαφόρων παθολογικών καταστάσεων. Η χολερυθρίνη, προϊόν της καταστροφής της αιμοσφαιρίνης, παρουσιάζεται σε δύο μορφές: άμεση (συζευγμένη) και έμμεση (μη συζευγμένη). Ο προσδιορισμός της σχετικής περιεκτικότητας αυτών των δύο μορφών χολερυθρίνης είναι απαραίτητος για τη διάγνωση και τη συνταγογράφηση της κατάλληλης θεραπείας.
Μία από τις μεθόδους που χρησιμοποιούνται για τον ξεχωριστό προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε άμεση και έμμεση χολερυθρίνη είναι η μέθοδος Varela-Fuentes. Αυτή η μέθοδος βασίζεται στις διαφορές μεταξύ της διαλυτότητας της άμεσης και της έμμεσης χολερυθρίνης σε διάφορους διαλύτες. Η άμεση χολερυθρίνη είναι ελάχιστα διαλυτή στο χλωροφόρμιο, ενώ η έμμεση χολερυθρίνη είναι ελάχιστα διαλυτή στο νερό.
Η διαδικασία της μεθόδου Varela-Fuentes περιλαμβάνει τα ακόλουθα βήματα:
-
Προετοιμασία δείγματος: Συλλέγεται δείγμα ορού που περιέχει χολερυθρίνη και το δείγμα χωρίζεται σε δύο μέρη. Το ένα μέρος χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της άμεσης χολερυθρίνης και το άλλο χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της έμμεσης χολερυθρίνης.
-
Προσδιορισμός άμεσης χολερυθρίνης: Το τμήμα του δείγματος ορού αίματος που προορίζεται για τον προσδιορισμό της άμεσης χολερυθρίνης αναμιγνύεται με χλωροφόρμιο. Η άμεση χολερυθρίνη περνά από την υδατική φάση στην οργανική φάση του χλωροφορμίου, όπου μπορεί να μετρηθεί η περιεκτικότητά της.
-
Προσδιορισμός έμμεσης χολερυθρίνης: Ένα άλλο μέρος του δείγματος ορού αίματος, που προορίζεται για τον προσδιορισμό της έμμεσης χολερυθρίνης, αναμιγνύεται με νερό. Η έμμεση χολερυθρίνη περνά από την οργανική φάση στην υδατική φάση, όπου μπορεί να μετρηθεί η περιεκτικότητά της.
-
Μέτρηση της περιεκτικότητας σε χολερυθρίνη: Η περιεκτικότητα σε άμεση και έμμεση χολερυθρίνη σε κάθε κλάσμα προσδιορίζεται με τη χρήση ειδικών αναλυτικών μεθόδων όπως η φασματοφωτομετρία ή η φθορισμό.
Μετά τον προσδιορισμό των επιπέδων της άμεσης και της έμμεσης χολερυθρίνης, τα αποτελέσματα μπορούν να ερμηνευθούν από γιατρό για να γίνει διάγνωση. Για παράδειγμα, τα υψηλά επίπεδα άμεσης χολερυθρίνης μπορεί να υποδηλώνουν προβλήματα με τον χοληδόχο πόρο ή το ήπαρ, ενώ τα αυξημένα επίπεδα έμμεσης χολερυθρίνης μπορεί να σχετίζονται με αιμολυτικές αναιμίες ή άλλες καταστάσεις στις οποίες υπάρχει αυξημένη καταστροφή των ερυθρών αιμοσφαιρίων.
Η μέθοδος Varela-Fuentes είναι μια αποτελεσματική και αξιόπιστη μέθοδος για τον ξεχωριστό προσδιορισμό της άμεσης και της έμμεσης χολερυθρίνης στον ορό του αίματος. Επιτρέπει στους γιατρούς να λαμβάνουν πληροφορίες σχετικά με τη λειτουργία του ήπατος και να αξιολογούν τη συνολική εικόνα του μεταβολισμού της χολερυθρίνης στο σώμα του ασθενούς. Αυτό είναι ιδιαίτερα σημαντικό στη διάγνωση και παρακολούθηση ηπατικών παθήσεων, παθήσεων της χοληφόρου οδού και αιμολυτικών αναιμιών.
Ωστόσο, πρέπει να σημειωθεί ότι η μέθοδος Varela-Fuentes έχει τους περιορισμούς της. Απαιτείται ειδικός εξοπλισμός και εμπειρία για την εκτέλεσή του, επομένως είναι δυνατή η πρόσβαση μόνο σε εργαστηριακό περιβάλλον. Επιπλέον, τα αποτελέσματα των εξετάσεων χολερυθρίνης πρέπει να ερμηνεύονται προσεκτικά στο πλαίσιο των άλλων κλινικών δεδομένων και συμπτωμάτων του ασθενούς.
Συμπερασματικά, η μέθοδος Varela-Fuentes είναι ένα χρήσιμο εργαλείο για τον ξεχωριστό προσδιορισμό της άμεσης και της έμμεσης χολερυθρίνης στον ορό του αίματος. Σας επιτρέπει να λαμβάνετε πληροφορίες σχετικά με τη λειτουργία του ήπατος και να διαγνώσετε διάφορες παθολογικές καταστάσεις που σχετίζονται με μειωμένο μεταβολισμό της χολερυθρίνης. Οι γιατροί μπορούν να χρησιμοποιήσουν αυτή τη μέθοδο για να λάβουν τεκμηριωμένες αποφάσεις σχετικά με τη θεραπεία και την παρακολούθηση ασθενών που είναι ευαίσθητοι σε διάφορες ασθένειες που σχετίζονται με το μεταβολισμό της χολερυθρίνης.
Το βρασμό του Fuentes είναι μια μέθοδος για τον προσδιορισμό της ποσότητας της χολερυθρίνης (ένα από τα συστατικά της χολής) που περιέχεται στο ανθρώπινο αίμα. Αυτή η μέθοδος έχει γίνει εξαιρετικά δημοφιλής μεταξύ ερευνητών και επιστημόνων στον τομέα της ιατρικής, καθώς επιτρέπει την ακριβέστερη διάγνωση ασθενειών που σχετίζονται με βιοχημικές παραμέτρους του αίματος. Για να εξασφαλιστεί η υψηλή ακρίβεια της ανάλυσης, είναι απαραίτητο να προετοιμαστεί σωστά το υπό μελέτη υλικό, καθώς και να αξιολογηθούν οι συνθήκες αντίδρασης.
Ο Varela Fuentes ανακάλυψε το γεγονός ότι οι χολερυθρίνες, οι οποίες είναι ενδιάμεσα προϊόντα του μεταβολισμού της αιμοσφαιρίνης, έχουν διαφορετικές ικανότητες να διαλύονται σε διαλύτες.
Για να προσδιορίσετε τα επίπεδα χολερυθρίνης, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε διαφορετικές μεθόδους αραίωσης που χρησιμοποιούνται σε ιατρικά εργαστήρια. Η πρώτη μέθοδος βασίζεται στην αντίδραση με ακεταλδεΰδη. Η συγκέντρωση της άμεσης και της έμμεσης χολερυθρίνης μετά από επεξεργασία με νερό-βουτανόλη μπορεί να προσδιοριστεί με ποιοτικές αντιδράσεις. Για τη μελέτη, χρησιμοποιείται θειική κινίνη, στην οποία προστίθεται ορός αίματος του ασθενούς. Πρέπει επίσης να προσθέσετε μια μικρή ποσότητα οξικού οξέος, που θα δώσει μια αντίδραση. Μετά την αντίδραση, πρέπει να παρατηρήσετε την εμφάνιση ενός έγχρωμου διαλύματος. Σύμφωνα με τον δείκτη, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται περιλαμβάνουν έναν ορισμένο αριθμό στο δείγμα. Για ένα αξιόπιστο συμπέρασμα, είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθεί η ανάλυση τουλάχιστον πέντε φορές. Ο δείκτης θα πρέπει να αξιολογείται μόνο κατά τη διαδικασία σύγκρισης με τον κανόνα. Η μέθοδος του Wohlers Fountes ήταν αρκετά απλή και εύκολη. Και η ακρίβειά του κατέστησε δυνατή τη χρήση αντιδραστηρίων από απλά είδη οικιακής χρήσης, όπως ιώδιο και άμυλο.