Варели-Фуентеса Метод: роздільне визначення вмісту прямого та непрямого білірубіну в сироватці крові
В області медичної діагностики та лабораторного аналізу сироватки крові визначення вмісту білірубіну є важливим параметром для оцінки функції печінки та діагностики різних патологічних станів. Білірубін, продукт руйнування гемоглобіну, представлений двома формами: прямим (кон'югованим) та непрямим (некон'югованим). Визначення відносного вмісту цих двох форм білірубіну є суттєвим для встановлення діагнозу та призначення відповідного лікування.
Одним з методів, що застосовуються для роздільного визначення вмісту прямого і непрямого білірубіну, є метод Варелі-Фуентеса. Цей метод заснований на відмінностях між розчинністю прямого та непрямого білірубіну у різних розчинниках. Прямий білірубін погано розчинний у хлороформі, тоді як непрямий білірубін погано розчинний у воді.
Процедура Варели-Фуентеса методу включає такі кроки:
-
Підготовка зразка Береться зразок сироватки крові, що містить білірубін, і проба поділяється на дві частини. Одна частина використовується визначення прямого білірубіну, а інша - визначення непрямого білірубіну.
-
Визначення прямого білірубіну: Частина зразка сироватки крові, призначена визначення прямого білірубіну, змішується з хлороформом. Прямий білірубін переходить із водної фази в органічну фазу хлороформу, де його вміст може бути виміряний.
-
Визначення непрямого білірубіну Інша частина зразка сироватки крові, призначена для визначення непрямого білірубіну, змішується з водою. Непрямий білірубін переходить із органічної фази у водну фазу, де його вміст може бути виміряний.
-
Вимір вмісту білірубіну: Зміст прямого та непрямого білірубіну в кожній фракції визначається з використанням спеціальних методів аналізу, таких як спектрофотометрія або флюориметрія.
Після визначення вмісту прямого та непрямого білірубіну результати можуть бути інтерпретовані лікарем для встановлення діагнозу. Наприклад, високий вміст прямого білірубіну може вказувати на наявність проблем з жовчними шляхами або печінкою, у той час як підвищений рівень непрямого білірубіну може бути пов'язаний з гемолітичними анеміями або іншими станами, при яких відбувається збільшення руйнування еритроцитів.
Варели-Фуентеса метод є ефективним та надійним способом роздільного визначення вмісту прямого та непрямого білірубіну у сироватці крові. Він дозволяє лікарям отримати інформацію про функції печінки та оцінити загальну картину обміну білірубіну в організмі пацієнта. Це особливо важливо при діагностиці та моніторингу захворювань печінки, жовчних шляхів, а також гемолітичних анемій.
Проте слід зазначити, що Варели-Фуентеса метод має обмеження. Він вимагає спеціального обладнання та досвіду для його проведення, тому може бути доступним лише в лабораторних умовах. Крім того, результати аналізу білірубіну повинні бути ретельно інтерпретовані у контексті інших клінічних даних та симптомів пацієнта.
Насамкінець, Варели-Фуентеса метод є корисним інструментом для роздільного визначення вмісту прямого та непрямого білірубіну в сироватці крові. Він дозволяє отримати інформацію про функцію печінки та діагностувати різні патологічні стани, пов'язані з порушенням обміну білірубіну. Лікарі можуть використовувати цей метод для прийняття обґрунтованих рішень про лікування та моніторинг пацієнтів, схильних до різних захворювань, пов'язаних з обміном білірубіну.
Варелі Фуентеса - це метод визначення кількості білірубіну (одного з компонентів жовчі), що міститься у крові людини. Даний метод став вкрай популярним серед дослідників та вчених у галузі медицини, оскільки дозволяє провести більш точну діагностику захворювань, пов'язаних з біохімічними показниками крові. Для забезпечення високої точності аналізу необхідно правильно провести підготовку матеріалу, що досліджується, так само дати оцінку умовам проведення реакцій.
Варели Фуентес виявив факт, що білірубіни, які є проміжними продуктами обміну гемоглобіну, мають різну здатність до розчинення в розчинниках.
Для визначення рівня білірубіну можна використовувати різні методи розведення, що використовуються у медичних лабораторіях. Перший метод базується на реакції з оцтовим альдегідом. Концентрація прямих та непрямих білірубінів після обробки водно-бутанолом можна визначити якісними реакціями. Для дослідження використовується сульфат хініну, куди додають сироватку крові пацієнта. Також потрібно додати невелику кількість оцтової кислоти, яка дасть реакцію. Після проведеної реакції слід спостерігати за появою забарвленого розчину. Згідно з індикатором, до отриманих результатів відносять певну кількість на пробі. Для достовірного висновку необхідно проводити аналіз щонайменше п'ять разів. Показник слід розцінювати лише у процесі порівняння з нормою. Метод Волерса Фоунтеса був досить простий та легкий. А його точність дозволило використовувати реактиви із простих побутових предметів, наприклад йод та крохмаль.