Метод на Варела-Фуентес: Отделно определяне на директен и индиректен билирубин в кръвен серум
В областта на медицинската диагностика и лабораторния анализ на кръвния серум определянето на съдържанието на билирубин е важен параметър за оценка на чернодробната функция и диагностициране на различни патологични състояния. Билирубинът, продукт на разрушаването на хемоглобина, се представя в две форми: директен (конюгиран) и индиректен (неконюгиран). Определянето на относителното съдържание на тези две форми на билирубин е от съществено значение за поставяне на диагноза и назначаване на подходящо лечение.
Един от методите, използвани за отделно определяне на съдържанието на директен и индиректен билирубин, е методът на Варела-Фуентес. Този метод се основава на разликите в разтворимостта на директния и индиректния билирубин в различни разтворители. Директният билирубин е слабо разтворим в хлороформ, докато индиректният билирубин е слабо разтворим във вода.
Процедурата по метода Varela-Fuentes включва следните стъпки:
-
Подготовка на пробата: Взима се проба от серум, съдържащ билирубин, и пробата се разделя на две части. Едната част се използва за определяне на директен билирубин, а другата се използва за определяне на индиректен билирубин.
-
Определяне на директен билирубин: Частта от пробата от кръвен серум, предназначена за определяне на директен билирубин, се смесва с хлороформ. Директният билирубин преминава от водната фаза в органичната фаза на хлороформа, където може да се измери съдържанието му.
-
Определяне на индиректен билирубин: Друга част от пробата от кръвен серум, предназначена за определяне на индиректен билирубин, се смесва с вода. Индиректният билирубин преминава от органичната фаза във водната фаза, където може да се измери съдържанието му.
-
Измерване на съдържанието на билирубин: Съдържанието на директен и индиректен билирубин във всяка фракция се определя с помощта на специални аналитични методи като спектрофотометрия или флуориметрия.
След определяне на нивата на директен и индиректен билирубин, резултатите могат да бъдат интерпретирани от лекар за поставяне на диагноза. Например високите нива на директен билирубин могат да показват проблеми с жлъчните пътища или черния дроб, докато повишените нива на индиректния билирубин могат да бъдат свързани с хемолитична анемия или други състояния, при които има повишено разрушаване на червените кръвни клетки.
Методът Varela-Fuentes е ефективен и надежден метод за отделно определяне на директен и индиректен билирубин в кръвния серум. Той позволява на лекарите да получат информация за функцията на черния дроб и да оценят цялостната картина на метаболизма на билирубина в тялото на пациента. Това е особено важно при диагностиката и проследяването на чернодробни заболявания, заболявания на жлъчните пътища и хемолитични анемии.
Все пак трябва да се отбележи, че методът Varela-Fuentes има своите ограничения. Изисква специално оборудване и опит за извършването му, така че може да бъде достъпен само в лабораторни условия. В допълнение, резултатите от теста за билирубин трябва внимателно да се интерпретират в контекста на другите клинични данни и симптоми на пациента.
В заключение, методът Varela-Fuentes е полезен инструмент за отделно определяне на директен и индиректен билирубин в кръвния серум. Позволява ви да получите информация за функцията на черния дроб и да диагностицирате различни патологични състояния, свързани с нарушен метаболизъм на билирубина. Лекарите могат да използват този метод, за да вземат информирани решения относно лечението и наблюдението на пациенти, податливи на различни заболявания, свързани с метаболизма на билирубина.
Фурункулът на Фуентес е метод за определяне на количеството билирубин (един от компонентите на жлъчката), съдържащ се в човешката кръв. Този метод стана изключително популярен сред изследователите и учените в областта на медицината, тъй като позволява по-точна диагностика на заболявания, свързани с биохимичните показатели на кръвта. За да се осигури висока точност на анализа, е необходимо правилно да се подготви изследваният материал, както и да се оценят условията на реакцията.
Варела Фуентес открива факта, че билирубините, които са междинни продукти от метаболизма на хемоглобина, имат различни способности да се разтварят в разтворители.
За да определите нивото на билирубина, можете да използвате различни методи за разреждане, използвани в медицинските лаборатории. Първият метод се основава на реакцията с ацеталдехид. Концентрацията на директен и индиректен билирубин след третиране с вода-бутанол може да се определи чрез качествени реакции. За изследването се използва хинин сулфат, към който се добавя кръвен серум на пациента. Също така трябва да добавите малко количество оцетна киселина, което ще даде реакция. След реакцията трябва да наблюдавате появата на цветен разтвор. По показателя получените резултати включват определен брой на извадката. За надеждно заключение е необходимо анализът да се извърши поне пет пъти. Индикаторът трябва да се оценява само в процеса на сравнение с нормата. Методът на Wohlers Fountes беше доста прост и лесен. И неговата точност направи възможно използването на реактиви от прости домакински предмети, като йод и нишесте.