Varela-Fuentes-menetelmä: Suoran ja epäsuoran bilirubiinin erillinen määritys vereseerumista
Lääketieteellisen diagnostiikan ja veriseerumin laboratorioanalyysin alalla bilirubiinipitoisuuden määritys on tärkeä parametri maksan toiminnan arvioinnissa ja erilaisten patologisten tilojen diagnosoinnissa. Bilirubiini, hemoglobiinin tuhoutumisen tuote, on kahdessa muodossa: suora (konjugoitu) ja epäsuora (konjugoitumaton). Näiden kahden bilirubiinimuodon suhteellisen sisällön määrittäminen on välttämätöntä diagnoosin määrittämiseksi ja asianmukaisen hoidon määräämiseksi.
Yksi menetelmistä, joilla määritetään erikseen suoran ja epäsuoran bilirubiinipitoisuus, on Varela-Fuentes-menetelmä. Tämä menetelmä perustuu eroihin suoran ja epäsuoran bilirubiinin liukoisuuden välillä eri liuottimiin. Suora bilirubiini liukenee huonosti kloroformiin, kun taas epäsuora bilirubiini liukenee huonosti veteen.
Varela-Fuentesin menetelmä sisältää seuraavat vaiheet:
-
Näytteen valmistus: Kerätään näyte bilirubiinia sisältävästä seerumista ja näyte jaetaan kahteen osaan. Toista osaa käytetään suoran bilirubiinin määrittämiseen ja toista epäsuoran bilirubiinin määrittämiseen.
-
Suoran bilirubiinin määritys: Se osa veriseeruminäytteestä, joka on tarkoitettu suoran bilirubiinin määritykseen, sekoitetaan kloroformin kanssa. Suora bilirubiini siirtyy vesifaasista kloroformin orgaaniseen faasiin, jossa sen pitoisuus voidaan mitata.
-
Epäsuoran bilirubiinin määritys: Toinen osa veriseeruminäytteestä, joka on tarkoitettu epäsuoran bilirubiinin määrittämiseen, sekoitetaan veteen. Epäsuora bilirubiini siirtyy orgaanisesta faasista vesifaasiin, jossa sen pitoisuus voidaan mitata.
-
Bilirubiinipitoisuuden mittaus: Suoran ja epäsuoran bilirubiinin pitoisuus kussakin fraktiossa määritetään erityisillä analyyttisilla menetelmillä, kuten spektrofotometrialla tai fluorimetrialla.
Suoran ja epäsuoran bilirubiinin tason määrittämisen jälkeen lääkäri voi tulkita tuloksia diagnoosin tekemiseksi. Esimerkiksi korkeat suoran bilirubiinin tasot voivat viitata ongelmiin sappitiehyissä tai maksassa, kun taas epäsuoran bilirubiinin kohonneet tasot voivat liittyä hemolyyttisiin anemioihin tai muihin tiloihin, joissa punasolujen tuhoutuminen lisääntyy.
Varela-Fuentes-menetelmä on tehokas ja luotettava menetelmä veren seerumin suoran ja epäsuoran bilirubiinin erilliseen määritykseen. Sen avulla lääkärit voivat saada tietoa maksan toiminnasta ja arvioida kokonaiskuvaa bilirubiinin aineenvaihdunnasta potilaan kehossa. Tämä on erityisen tärkeää maksasairauksien, sappitiesairauksien ja hemolyyttisten anemioiden diagnosoinnissa ja seurannassa.
On kuitenkin huomattava, että Varela-Fuentesin menetelmällä on rajoituksensa. Sen suorittaminen vaatii erikoislaitteita ja kokemusta, joten siihen pääsee käsiksi vain laboratorioympäristössä. Lisäksi bilirubiinitestin tuloksia on tulkittava huolellisesti potilaan muiden kliinisten tietojen ja oireiden yhteydessä.
Yhteenvetona voidaan todeta, että Varela-Fuentesin menetelmä on käyttökelpoinen työkalu suoran ja epäsuoran bilirubiinin erilliseen määrittämiseen veren seerumissa. Sen avulla voit saada tietoa maksan toiminnasta ja diagnosoida erilaisia patologisia tiloja, jotka liittyvät heikentyneeseen bilirubiinin aineenvaihduntaan. Lääkärit voivat käyttää tätä menetelmää tehdäkseen tietoisia päätöksiä eri bilirubiiniaineenvaihduntaan liittyville sairauksille alttiiden potilaiden hoidosta ja seurannasta.
Fuentesin kiehuminen on menetelmä ihmisen veren sisältämän bilirubiinin (yksi sapen komponenteista) määrittämiseksi. Tästä menetelmästä on tullut erittäin suosittu lääketieteen alan tutkijoiden ja tiedemiesten keskuudessa, koska se mahdollistaa biokemiallisiin veren parametreihin liittyvien sairauksien tarkemman diagnosoinnin. Analyysin suuren tarkkuuden varmistamiseksi on tarpeen valmistaa tutkittava materiaali oikein ja arvioida reaktio-olosuhteet.
Varela Fuentes havaitsi, että bilirubiinit, jotka ovat hemoglobiiniaineenvaihdunnan välituotteita, liukenevat eri tavoin liuottimiin.
Bilirubiinitason määrittämiseen voit käyttää erilaisia lääketieteellisissä laboratorioissa käytettyjä laimennusmenetelmiä. Ensimmäinen menetelmä perustuu reaktioon asetaldehydin kanssa. Suoran ja epäsuoran bilirubiinin pitoisuus vesi-butanolikäsittelyn jälkeen voidaan määrittää kvalitatiivisilla reaktioilla. Tutkimuksessa käytetään kiniinisulfaattia, johon lisätään potilaan veriseerumia. Sinun on myös lisättävä pieni määrä etikkahappoa, joka antaa reaktion. Reaktion jälkeen sinun on tarkkailtava värillisen liuoksen ulkonäköä. Indikaattorin mukaan saadut tulokset sisältävät tietyn määrän otoksesta. Luotettavan johtopäätöksen saamiseksi analyysi on suoritettava vähintään viisi kertaa. Indikaattoria tulisi arvioida vain vertailussa normiin. Wohlers Fountesin menetelmä oli melko yksinkertainen ja helppo. Ja sen tarkkuus mahdollisti reagenssien käytön yksinkertaisista taloustavaroista, kuten jodista ja tärkkelyksestä.