Μέθοδος Kunkel-Pearson-Schweigerta

Η μέθοδος Kunkel Pearson Schweigert (KPS) είναι μία από τις μεθόδους για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης πρωτεΐνης σε βιολογικά δείγματα. Αναπτύχθηκε τη δεκαετία του 1970 από τον Αμερικανό βιοχημικό George Kunkel. Η μέθοδος βασίζεται στη χρήση δύο αντιδραστηρίων: χρωστικής διουρίας και διαλύματος θειικού χαλκού.

Όταν το αντιδραστήριο διουρίας αλληλεπιδρά με πρωτεΐνες, σχηματίζεται ένα έγχρωμο σύμπλεγμα. Αυτό το σύμπλεγμα μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας ένα διάλυμα θειικού χαλκού, το οποίο σχηματίζει ένα μπλε χρώμα με το σύμπλοκο. Όσο περισσότερες πρωτεΐνες στο δείγμα, τόσο περισσότερα σύμπλοκα σχηματίζονται και τόσο πιο φωτεινό γίνεται το μπλε χρώμα.

Για να γίνει η ανάλυση, είναι απαραίτητο να παρασκευαστεί ένα δείγμα που περιέχει πρωτεΐνες. Αυτό μπορεί να είναι ορός αίματος, πλάσμα, ούρα ή άλλα βιολογικά υγρά. Στη συνέχεια το δείγμα αναμιγνύεται με αντιδραστήριο διουρίας και διάλυμα θειικού χαλκού και αφήνεται για κάποιο χρονικό διάστημα. Ως αποτέλεσμα, σχηματίζεται ένα έγχρωμο σύμπλεγμα, η ένταση του οποίου μετράται χρησιμοποιώντας ένα φωτόμετρο.

Η μέθοδος Kunkel Pearson Schweigert έχει υψηλή ακρίβεια και ευαισθησία. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης πρωτεϊνών σε ένα ευρύ φάσμα συγκεντρώσεων, από χαμηλές τιμές έως αρκετές χιλιάδες mg/ml. Επιπλέον, η μέθοδος είναι γρήγορη και εύκολη στη χρήση.

Ωστόσο, όπως κάθε άλλη μέθοδος για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης πρωτεΐνης, η μέθοδος KPS έχει τους περιορισμούς της. Για παράδειγμα, δεν είναι κατάλληλο για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης ορισμένων πρωτεϊνών, όπως η αιμοσφαιρίνη και η μυοσφαιρίνη, οι οποίες μπορούν να σχηματίσουν σύμπλοκα με άλλες ουσίες. Επίσης, η μέθοδος δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης πολλών πρωτεϊνών σε πολύπλοκα βιολογικά δείγματα όπως ιστοί και κύτταρα.

Συνολικά, η μέθοδος Kunkel-Pearson-Schweigert είναι ένα χρήσιμο εργαλείο για τη μελέτη πρωτεϊνών σε βιολογικά δείγματα και μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε διάφορους τομείς όπως η ιατρική, η βιολογία και η βιοχημεία.