Kunkel-Pearson-Schweigerta menetelmä

Kunkel Pearson Schweigert -menetelmä (KPS) on yksi menetelmistä proteiinipitoisuuden määrittämiseksi biologisista näytteistä. Sen kehitti 1970-luvulla amerikkalainen biokemisti George Kunkel. Menetelmä perustuu kahden reagenssin käyttöön: biureettiväriaineen ja kuparisulfaattiliuoksen.

Kun biureettireagenssi on vuorovaikutuksessa proteiinien kanssa, muodostuu värillinen kompleksi. Tämä kompleksi voidaan havaita käyttämällä kuparisulfaattiliuosta, joka muodostaa sinisen värin kompleksin kanssa. Mitä enemmän proteiineja näytteessä on, sitä enemmän komplekseja muodostuu ja sitä kirkkaammaksi sinisestä väristä tulee.

Analyysin suorittamiseksi on tarpeen valmistaa proteiineja sisältävä näyte. Tämä voi olla veriseerumia, plasmaa, virtsaa tai muita biologisia nesteitä. Näyte sekoitetaan sitten biureettireagenssin ja kuparisulfaattiliuoksen kanssa ja jätetään jonkin aikaa. Tämän seurauksena muodostuu värillinen kompleksi, jonka intensiteetti mitataan fotometrillä.

Kunkel Pearson Schweigert -menetelmällä on korkea tarkkuus ja herkkyys. Sitä voidaan käyttää proteiinipitoisuuden määrittämiseen laajalla pitoisuuksien alueella, alhaisista arvoista useisiin tuhansiin mg/ml. Lisäksi menetelmä on nopea ja helppokäyttöinen.

Kuitenkin, kuten kaikilla muillakin proteiinipitoisuuden määrittämismenetelmillä, KPS-menetelmällä on rajoituksensa. Se ei esimerkiksi sovellu tiettyjen proteiinien, kuten hemoglobiinin ja myoglobiinin, pitoisuuden määrittämiseen, jotka voivat muodostaa komplekseja muiden aineiden kanssa. Menetelmää ei myöskään voida käyttää monien proteiinien pitoisuuden määrittämiseen monimutkaisissa biologisissa näytteissä, kuten kudoksissa ja soluissa.

Kaiken kaikkiaan Kunkel-Pearson-Schweigert-menetelmä on hyödyllinen työkalu proteiinien tutkimiseen biologisista näytteistä ja sitä voidaan käyttää useilla aloilla, kuten lääketieteessä, biologiassa ja biokemiassa.