Kunkel-Pearson-Schweigerta Yöntemi

Kunkel Pearson Schweigert yöntemi (KPS), biyolojik numunelerdeki protein konsantrasyonunu belirlemeye yönelik yöntemlerden biridir. 1970'lerde Amerikalı biyokimyacı George Kunkel tarafından geliştirildi. Yöntem iki reaktifin kullanımına dayanmaktadır: biüre boyası ve bakır sülfat çözeltisi.

Biüre reaktifi proteinlerle etkileşime girdiğinde renkli bir kompleks oluşur. Bu kompleks, kompleksle birlikte mavi bir renk oluşturan bir bakır sülfat çözeltisi kullanılarak tespit edilebilir. Numunede ne kadar çok protein olursa o kadar çok kompleks oluşur ve mavi renk o kadar parlak olur.

Analizi gerçekleştirmek için protein içeren bir numune hazırlamak gerekir. Bu kan serumu, plazma, idrar veya diğer biyolojik sıvılar olabilir. Numune daha sonra biüre reaktifi ve bakır sülfat çözeltisi ile karıştırılarak bir süre bekletilir. Sonuç olarak, yoğunluğu bir fotometre kullanılarak ölçülen renkli bir kompleks oluşur.

Kunkel Pearson Schweigert yöntemi yüksek doğruluk ve duyarlılığa sahiptir. Düşük değerlerden birkaç bin mg/ml'ye kadar geniş bir konsantrasyon aralığında protein konsantrasyonunu belirlemek için kullanılabilir. Üstelik yöntemin kullanımı hızlı ve kolaydır.

Ancak protein konsantrasyonunu belirlemeye yönelik diğer yöntemler gibi KPS yönteminin de sınırlamaları vardır. Örneğin hemoglobin ve miyoglobin gibi diğer maddelerle kompleks oluşturabilen bazı proteinlerin konsantrasyonunu belirlemek için uygun değildir. Ayrıca yöntem, dokular ve hücreler gibi karmaşık biyolojik numunelerdeki birçok proteinin konsantrasyonunu belirlemek için kullanılamaz.

Genel olarak Kunkel-Pearson-Schweigert yöntemi biyolojik örneklerdeki proteinleri incelemek için yararlı bir araçtır ve tıp, biyoloji ve biyokimya gibi çeşitli alanlarda kullanılabilir.