Ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση

Η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση είναι μια αναλυτική μέθοδος που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της συγκέντρωσης διαφόρων ουσιών σε δείγματα βιολογικών υγρών όπως αίμα, ούρα, σάλιο κ.λπ. Αυτή η μέθοδος βασίζεται στη χρήση ραδιενεργών ισοτόπων για την επισήμανση των αναλυτών και στη συνέχεια τον διαχωρισμό και την ανίχνευση τους χρησιμοποιώντας ηλεκτροφόρηση.

Η αρχή λειτουργίας της ραδιοανοσοηλεκτροφόρησης είναι η εξής. Αρχικά, ένα δείγμα του βιορευστού τοποθετείται σε ένα ειδικό διάλυμα που περιέχει ραδιενεργούς ιχνηθέτες που συνδέονται με τις ουσίες που αναλύονται. Το δείγμα στη συνέχεια υποβάλλεται σε ηλεκτροφόρηση, επιτρέποντας τον διαχωρισμό των σχετικών ραδιενεργών ανιχνευτών και αναλυτών. Μετά από αυτό, οι ραδιενεργοί ιχνηθέτες ανιχνεύονται χρησιμοποιώντας έναν ειδικό ανιχνευτή.

Η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση χρησιμοποιείται ευρέως στην ιατρική για τη διάγνωση διαφόρων ασθενειών όπως ο καρκίνος, τα αυτοάνοσα νοσήματα κ.λπ. Χρησιμοποιείται επίσης στην επιστημονική έρευνα για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών και λειτουργιών διαφόρων πρωτεϊνών και άλλων μοριακών συστατικών.

Ένα από τα κύρια πλεονεκτήματα της ραδιοανοσοηλεκτροφόρησης είναι η υψηλή ευαισθησία και ειδικότητά της. Με αυτή τη μέθοδο είναι δυνατός ο προσδιορισμός πολύ χαμηλών συγκεντρώσεων αναλυτών σε ένα δείγμα βιορευστού. Επιπλέον, η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση παρέχει δεδομένα σχετικά με τη συγκέντρωση των αναλυτών με την πάροδο του χρόνου, τα οποία μπορεί να είναι χρήσιμα για την παρακολούθηση της υγείας των ασθενών ή την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.

Ωστόσο, όπως κάθε άλλη μέθοδος ανάλυσης, η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση έχει τους περιορισμούς της. Για παράδειγμα, μπορεί να μην είναι αποτελεσματικό κατά την ανάλυση σύνθετων δειγμάτων βιορευστού που περιέχουν μεγάλες ποσότητες ακαθαρσιών. Επίσης, η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση απαιτεί ειδικό εξοπλισμό και εκπαιδευμένο προσωπικό.

Συνολικά, η ραδιοανοσοηλεκτροφόρηση είναι ένα σημαντικό εργαλείο στην ιατρική διαγνωστική και την επιστημονική έρευνα, το οποίο παρέχει πιο ακριβή και αξιόπιστα αποτελέσματα σε σύγκριση με άλλες αναλυτικές μεθόδους.

Η ραδιοανοσο-ηλεκτροφόρηση, RIEF, είναι μια τεχνική για τον διαχωρισμό και τον καθαρισμό βιολογικών μακρομορίων. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται συχνά στη βιολογία, τη βιοχημεία και την ιατρική και εκτελείται χρησιμοποιώντας ραδιοϊσότοπα που παρέχουν σήματα χημειοφωταύγειας για να επιτρέπουν την οπτικοποίηση των μορίων σε διάλυμα. Η μέθοδος RIEF αναπτύχθηκε τη δεκαετία του 1960 από τους Louis Forner, Martin Krutzsch και Ivan Hait, οι οποίοι έλαβαν το Νόμπελ Χημείας το 1982 για την εργασία τους στο τεστ μέτρησης πρωτεΐνης S. Στο RIEF, οι πρωτεΐνες επισημαίνονται με διαφορετικές φθορίζουσες ενώσεις, γεγονός που τους επιτρέπει να οπτικοποιούνται εύκολα σε ένα πήκτωμα.

Η γενική αρχή πίσω από τα εξαρτήματα RIEFPure κινούνται γρηγορότερα μέσω της γέλης από ότι τα συνδεδεμένα εξαρτήματα. Επομένως, ρυθμίζοντας τη συγκέντρωση των συστατικών και το pH της γέλης, είναι δυνατός ο διαχωρισμός τους με βάση την κινητικότητά τους. Αυτός ο διαχωρισμός επιτρέπει στους ερευνητές να προσδιορίσουν το μοριακό βάρος της πρωτεΐνης που αναλύεται και να αναγνωρίσουν τα δομικά χαρακτηριστικά της. Η τεχνική έχει χρησιμοποιηθεί για την ανάλυση διαφόρων τύπων πρωτεϊνών, συμπεριλαμβανομένων αντισωμάτων, ορμονών, υποδοχέων κυττάρων και ενζύμων, και έχει επίσης χρησιμοποιηθεί σε ανοσοδιαγνωστικές δοκιμές με τον εντοπισμό συγκεκριμένων πρωτεϊνών που σχετίζονται με συγκεκριμένες ασθένειες.

Υπάρχουν πολλές διαφορετικές τροποποιήσεις του RIEF, συμπεριλαμβανομένης της ισοηλεκτρικής εστίασης, της ηλεκτροφόρησης αντίστροφης φάσης και της τριχοειδούς ηλεκτροφόρησης. Οι περισσότερες εκδόσεις του RIEF απαιτούν εξειδικευμένο εξοπλισμό και πρωτόκολλα λόγω της εξάρτησής τους από ραδιενεργά ισότοπα για την επίτευξη ευαισθησίας και ειδικότητας. Ωστόσο, οι πρόσφατες εξελίξεις στον αυτοματισμό και το λογισμικό κατέστησαν δυνατή την αποτελεσματικότερη και ακριβέστερη εκτέλεση των διαδικασιών RIEF, ακόμη και σε μικρά εργαστήρια χωρίς πρόσβαση σε ακριβό εξοπλισμό. Το RIEF μπορεί επίσης να προσαρμοστεί σε ανάλυση πρωτεϊνών υψηλής απόδοσης, καθώς και σε εφαρμογές βιοπληροφορικής όπως η πρωτεϊνική.

Το RIEF είναι ένα ισχυρό εργαλείο για την επιστημονική ερευνητική κοινότητα, που επιτρέπει στους ερευνητές να αποκτήσουν κρίσιμες γνώσεις σχετικά με τη δομή, τη λειτουργία και τις αλληλεπιδράσεις των πρωτεϊνών μέσα στο σώμα. Το μέλλον υπόσχεται περαιτέρω βελτίωση και εφαρμογή αυτής της τεχνικής στη μοριακή διάγνωση, την ανακάλυψη φαρμάκων και τις κλινικές δοκιμές.

Μέθοδος βάσης на использовании антисыворотки, specificheskoy к данному гормональному веществу, который меченый радиоактивными изотопами. Для проведения исследования можно е να χρησιμοποιηθούν οι πιο γνωστές μορφώσεις: sыvorotku krovic, ликвор, mochu, gormonы-regulyatorы (τιρεοτροπνый, gonadotropnый και άλλα). Но чаще всего проводится проток сыворотки крови, обеспечивающий наибольшую чувствительность ανάλυση.