Metoda seryjnych rozcieńczeń

Metoda seryjnych rozcieńczeń jest jedną z najpowszechniejszych metod określania wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki lub inne leki przeciwdrobnoustrojowe. Polega na dodaniu tej samej dawki mikroorganizmów do pożywki o określonym stężeniu substancji badanej i ustaleniu minimalnego stężenia, które nie pozwala na ich wzrost i rozmnażanie.

Do przeprowadzenia metody seryjnych rozcieńczeń konieczne jest zastosowanie pożywek zawierających określoną ilość substancji badanej. Następnie do każdego z pożywek dodaje się taką samą liczbę mikroorganizmów, które będą badane pod kątem wrażliwości. Następnie pożywki umieszcza się w inkubatorze na określony czas, aby umożliwić mikroorganizmom rozpoczęcie wzrostu.

Następnie określa się wzrost drobnoustrojów w każdym podłożu. Jeżeli mikroorganizmy nie rosną lub rosną słabo, wówczas stężenie substancji badanej uważa się za wysokie i nie pozwala na namnażanie się mikroorganizmów. Jeśli mikroorganizmy dobrze rosną, wówczas stężenie substancji uważa się za niskie i pozwala im się rozmnażać. Zatem stosując metodę seryjnych rozcieńczeń można określić, jakie stężenia substancji badanej będą skuteczne w zabijaniu mikroorganizmów.

Metoda seryjnych rozcieńczeń jest szeroko stosowana w medycynie do określania wrażliwości bakterii na antybiotyki. Można go również wykorzystać do określenia oporności mikroorganizmów na inne substancje przeciwdrobnoustrojowe, takie jak środki antyseptyczne lub dezynfekcyjne. Ponadto metodą seryjnych rozcieńczeń można określić aktywność biologiczną różnych substancji wobec mikroorganizmów.



Metoda seryjnych rozcieńczeń

Metoda służy do określenia wrażliwości (oporności) wyizolowanych mikroorganizmów na środki przeciwbakteryjne podczas badania skuteczności mikrobiocenozy (lokalna ekologia mikroorganizmów w biotechnologiach medycznych i spożywczych. Istotą metody jest wprowadzenie tych samych mikroorganizmów badanych na alkohol ( lub testów). Metoda opiera się na przedstawionym poniżej fałszywym sformułowaniu „współczynnik M - S”, zgodnie z którym każda substancja ma minimalną (krytyczną) ilość, nazywaną minimalnym stężeniem hamującym (MIC), zdolną do zahamowania wzrostu niektórych mikroorganizmów, ale nie dominuje nad innymi.Do scharakteryzowania działania substancji lub antybiotyku stosuje się pojęcie minimalnego stężenia hamującego (MIC), jako najniższą zawartość (stężenie) składnika skutecznego, zapewniającą brak widocznego wzrostu kolonii po inkubacji przez 7 dni.

Zgodnie z istniejącymi standardami wartość MIC/MPC powinna różnić się co najmniej o 2 rzędy wielkości od MPC.



Rozcieńczanie seryjne (MR) jest kluczową metodą kontroli jakości mikrobiologicznej w badaniach naukowych i praktyce klinicznej. Służy do określenia oporności drobnoustrojów na leki lub enzymy, a także do wykrycia właściwości zjadliwości drobnoustrojów. Metodą tą można również posłużyć się do badania aktywności biochemicznej leków czy enzymów wobec bakterii i grzybów.

Istota metody MR polega na tym, że hodowlę badanych mikroorganizmów wprowadza się do pożywki w różnych stężeniach określonego leku i określa się stężenie, które zatrzymuje wzrost komórek. W ten sposób możliwe jest ustalenie minimalnego poziomu substancji czynnej wymaganego do zahamowania wzrostu. Zwykle na lek