Пирамидоновая Проба

Несмотря на то, что амидопириновые пробы используют только в микробиологической практике для дифференциации некоторых видов бактерий, существуют и другие, более простые и менее трудоемкие методы, которые могут быть использованы для этой цели. Одним из таких методов является пирамидоновая или пиридоксиновая проба. Эта техника очень проста, а ингредиенты для ее проведения доступны во многих аптеках или магазинах химических товаров.

1. Принцип метода Пирамидоновые или пиритоновые пробы основаны на различном действии пирамидона (piromidon) и тироксина (tirokseen) на стрептококки группы А. Стрептококк делится на две основные группы, одна из которых включает S. pyogenes, другая – S. faecalis. Эти организмы проявляют схожую метаболическую активность. В присутствии йода тироксин и йод убивают бактерии группы A. Йод является питательным элементом, в то время как тироксин, который продуцируют различные бактерии, может заменить йод. В итоге, бактерии, включая штаммы, устойчивые к йоду, погибают. Пирамидон, с другой стороны, является ферментом, способным гидролизовать различные вещества, включая тирокзин и продукты его метаболизма. Он не обладает способностью подавлять метаболизм бактерий. Если стрелки горят ярче в присутствии пирамидона, значит, они принадлежат к стрептококкам группы А. Таким образом, это два фермента, один из которых имеет свойства, ингибирующие метаболизм бактерии типа А, а другой разрушает и утилизирует эти биомолекулы. Поскольку ферменты, используемые в этом тесте, абсолютно специфичны для определенного вида микрофлоры, результаты являются надежными и практически лишены ложных положительных результатов.

Пирамидонная проба (или пирамидоновый тест, амидопирина проба) — реактив в микробиологии для идентификации бактерий по способности изменять цвет своей колонии после добавления кристаллов амидопиринового реактива. Тест разработан в 1913 году Георгом Грундманном.

*Бутандиовая кислота (масляная) и пирамидон (соль бензойной кислоты)* образуют желтый пигмент, а отсутствие реакции считают отрицательным результатом пробы. Присутствие пигмента — положительный результат пробы. При смешивании сусла с водой с добавлением амидопиринов и красного красителя — соли тетразолия (пара-фенилендиаминсульфокислота), цвет колонии меняется в результате образования большого количества неферментативного вторичного продукта (молочной кислоты и жёлтых осадков), который делает окраску среды более интенсивной жёлтого цвета, очень быстро убирая чёрный фон. Изменение цвета колонии указывает на наличие жизнеспособных дегидрогеназ бактерий.