Piramidetest

Ondanks het feit dat amidopyrinetesten alleen in de microbiologische praktijk worden gebruikt om bepaalde soorten bacteriën te onderscheiden, zijn er andere, eenvoudigere en minder arbeidsintensieve methoden die voor dit doel kunnen worden gebruikt. Eén van deze methoden is de piramide- of pyridoxinetest. Deze techniek is heel eenvoudig en de ingrediënten ervoor zijn verkrijgbaar in veel apotheken of winkels voor chemische artikelen.

1. Het principe van de methode Pyramidon- of pyriton-tests zijn gebaseerd op de verschillende effecten van piramideon (piromidon) en thyroxine (tirokseen) op streptokokken van groep A. Streptococcus is verdeeld in twee hoofdgroepen, waarvan er één S. pyogenes omvat, de andere - S. faecalis. Deze organismen vertonen vergelijkbare metabolische activiteiten. In aanwezigheid van jodium doden thyroxine en jodium de bacteriën van groep A. Jodium is een voedingsstof, terwijl thyroxine, dat door verschillende bacteriën wordt geproduceerd, jodium kan vervangen. Als gevolg hiervan sterven bacteriën, inclusief stammen die resistent zijn tegen jodium. Pyramidon daarentegen is een enzym dat verschillende stoffen kan hydrolyseren, waaronder tyroxine en zijn metabolische producten. Het heeft niet het vermogen om het bacteriële metabolisme te remmen. Als de pijlen helderder gloeien in de aanwezigheid van Pyramidone, behoren ze tot de streptokokken van groep A. Dit zijn dus twee enzymen waarvan er één eigenschappen heeft die de stofwisseling van bacteriën van type A remmen, en de andere deze biomoleculen afbreekt en gebruikt. Omdat de bij deze test gebruikte enzymen absoluut specifiek zijn voor een bepaalde microflorasoort, zijn de resultaten betrouwbaar en vrijwel zonder vals-positieven.

Pyramidon-test (of piramidetest, amidopyrinetest) is een reagens in de microbiologie voor het identificeren van bacteriën door het vermogen om de kleur van zijn kolonie te veranderen na toevoeging van amidopyrine-reagenskristallen. De test werd in 1913 ontwikkeld door Georg Grundmann.

*Butaandizuur (boterzuur) en piramideon (benzoëzuurzout)* vormen een geel pigment en het uitblijven van een reactie wordt als een negatief testresultaat beschouwd. De aanwezigheid van pigment is een positief testresultaat. Bij het mengen van het wort met water met toevoeging van amidopyrines en een rode kleurstof - tetrazoliumzout (p-fenyleendiaminesulfonzuur), verandert de kleur van de kolonie als gevolg van de vorming van een grote hoeveelheid niet-enzymatisch secundair product (melkzuur en gele sedimenten), waardoor de kleur van het medium intenser geel wordt, waardoor de zwarte achtergrond zeer snel wordt verwijderd. Een verandering in de kleur van de kolonie duidt op de aanwezigheid van levensvatbare bacteriële dehydrogenasen.