Thử nghiệm kim tự tháp

Mặc dù thực tế là các xét nghiệm amidopyrine chỉ được sử dụng trong thực hành vi sinh để phân biệt một số loại vi khuẩn, vẫn có những phương pháp khác đơn giản hơn và ít tốn nhiều công sức hơn có thể được sử dụng cho mục đích này. Một trong những phương pháp này là thử nghiệm Pyramidon hoặc pyridoxine. Kỹ thuật này rất đơn giản và nguyên liệu thực hiện có sẵn ở nhiều hiệu thuốc hoặc cửa hàng cung cấp hóa chất.

1. Nguyên lý của phương pháp xét nghiệm Pyramidon hoặc pyriton dựa trên tác dụng khác nhau của Pyramidon (piromidon) và thyroxine (tirokseen) đối với liên cầu khuẩn nhóm A. Streptococcus được chia thành hai nhóm chính, một nhóm bao gồm S. pyogenes, nhóm còn lại - S. faecalis. Những sinh vật này thể hiện các hoạt động trao đổi chất tương tự. Với sự hiện diện của iốt, thyroxine và iốt tiêu diệt vi khuẩn nhóm A. Iốt là một chất dinh dưỡng, trong khi thyroxine, được sản xuất bởi nhiều loại vi khuẩn, có thể thay thế iốt. Kết quả là vi khuẩn, bao gồm cả các chủng kháng iốt, sẽ chết. Mặt khác, Pyramidon là một enzyme có khả năng thủy phân nhiều chất khác nhau, bao gồm tyroxine và các sản phẩm trao đổi chất của nó. Nó không có khả năng ức chế sự trao đổi chất của vi khuẩn. Nếu mũi tên phát sáng hơn khi có sự hiện diện của Pyramidone thì chúng thuộc liên cầu khuẩn nhóm A. Như vậy, đây là hai enzyme, một trong số đó có đặc tính ức chế quá trình trao đổi chất của vi khuẩn loại A, còn enzyme kia phân hủy và sử dụng các phân tử sinh học này. Vì các enzyme được sử dụng trong xét nghiệm này hoàn toàn đặc hiệu cho một loài vi sinh vật cụ thể nên kết quả rất đáng tin cậy và hầu như không có kết quả dương tính giả.

Xét nghiệm Pyramidon (hay xét nghiệm Pyramidon, xét nghiệm amidopyrine) là một thuốc thử trong vi sinh dùng để xác định vi khuẩn bằng khả năng thay đổi màu sắc của khuẩn lạc sau khi thêm tinh thể thuốc thử amidopyrine. Bài kiểm tra được phát triển vào năm 1913 bởi Georg Grundmann.

*Axit butanedioic (axit butyric) và Pyramidone (muối của axit benzoic)* tạo thành sắc tố màu vàng và việc không có phản ứng được coi là kết quả xét nghiệm âm tính. Sự hiện diện của sắc tố là kết quả xét nghiệm dương tính. Khi trộn dịch nha với nước có thêm amidopyrine và thuốc nhuộm màu đỏ - muối tetrazolium (axit p-phenylenediaminesulfonic), màu sắc của khuẩn lạc thay đổi do hình thành một lượng lớn sản phẩm thứ cấp không chứa enzyme (axit lactic). và trầm tích màu vàng), làm cho màu của môi trường có màu vàng đậm hơn, loại bỏ nền đen rất nhanh. Sự thay đổi màu khuẩn lạc cho thấy sự hiện diện của dehydrogenase vi khuẩn còn sống.