Незважаючи на те, що амідопіринові проби використовують тільки в мікробіологічній практиці для диференціації деяких видів бактерій, існують інші, більш прості і менш трудомісткі методи, які можуть бути використані для цієї мети. Одним з таких методів є пірамідонова або піридоксинова проба. Ця техніка дуже проста, а інгредієнти для її проведення доступні у багатьох аптеках чи магазинах хімічних товарів.
1. Принцип методу Пірамідонові або піритонові проби засновані на різній дії пірамідону (piromidon) і тироксину (tirokseen) на стрептококи групи А. Стрептококи ділиться на дві основні групи, одна з яких включає S. pyogenes, інша – S. faecalis. Ці організми виявляють схожу метаболічну активність. У присутності йоду тироксин та йод вбивають бактерії групи A. Йод є поживним елементом, тоді як тироксин, який продукують різні бактерії, може замінити йод. У результаті бактерії, включаючи штами, стійкі до йоду, гинуть. Пірамідон, з іншого боку, є ферментом, здатним гідролізувати різні речовини, включаючи тирокзин та продукти його метаболізму. Він не має здатності пригнічувати метаболізм бактерій. Якщо стрілки горять яскравіше у присутності пірамідону, отже, вони належать до стрептококів групи А. Таким чином, це два ферменти, один з яких має властивості, що інгібують метаболізм бактерії типу А, а інший руйнує та утилізує ці біомолекули. Оскільки ферменти, що використовуються в цьому тесті, абсолютно специфічні для певного виду мікрофлори, результати є надійними та практично позбавлені хибних позитивних результатів.
Пірамідонна проба (або пірамідоновий тест, амідопірину проба) – реактив у мікробіології для ідентифікації бактерій за здатністю змінювати колір своєї колонії після додавання кристалів амідопіринового реактиву. Тест розроблений 1913 року Георгом Грундманном.
*Бутандіова кислота (масляна) і пірамідон (сіль бензойної кислоти)* утворюють жовтий пігмент, а відсутність реакції вважають негативним результатом проби. Присутність пігменту – позитивний результат проби. При змішуванні сусла з водою з додаванням амідопіринів і червоного барвника - солі тетразолію (пара-фенілендіамінсульфокислота), колір колонії змінюється в результаті утворення великої кількості неферментативного вторинного продукту (молочної кислоти та жовтих опадів), який робить забарвлення середовища більш інтенсивним жовтого кольору. забираючи чорний фон. Зміна кольору колонії свідчить про наявність життєздатних дегидрогеназ бактерій.