Kullberg-Malyarevsky menetelmä

Kullberg-Malyarevskaya-menetelmä on menetelmä transaminaasien aktiivisuuden määrittämiseksi veren seerumissa, jota ehdottivat Neuvostoliiton biokemistit L.M. Kullberg ja M.E. Maljarevskaja.

Menetelmän ydin on määrittää pyruvaatin muodostumisnopeus alaniinin tai aspartaatin transaminoinnin seurauksena. Tässä tapauksessa käytetään erityisiä substraatteja: L-alaniini + α-ketoglutaraatti (ALAT:n määrittämiseen) tai L-aspartaatti + α-ketoglutaraatti (AST:n määrittämiseen). Tuloksena oleva pyruvaatti reagoi 2,4-dinitrofenyylihydratsiinin kanssa muodostaen värillisen yhdisteen, jonka määrä mitataan fotometrisesti.

Menetelmälle on ominaista korkea herkkyys ja spesifisyys. Sen avulla voit määrittää erikseen ALT- ja AST-aktiivisuuden veren seerumissa, mikä on tärkeää maksasairauksien erotusdiagnoosissa. Menetelmää käytetään laajasti kliinisessä biokemiassa.

Kullberg-Malyarevsky menetelmä

Kulberg-Malyarevsky-menetelmä on neuvostoliittolaisten biokemistien L. M. Kulbergin ja M. E. Maljarevskajan kehittämä menetelmä biologisten nesteiden ja kudosten proteiinipitoisuuden määrittämiseksi. Menetelmä perustuu proteiinien ja väriaineen bromifenolisinisen väliseen reaktioon ja sitä seuraavaan liuoksen värin intensiteetin mittaamiseen.

Menetelmän periaate on, että liuoksessa olevat proteiinit ovat vuorovaikutuksessa väriaineen kanssa muodostaen värillisiä komplekseja. Värin voimakkuus riippuu liuoksessa olevan proteiinin määrästä. Värin voimakkuuden mittaamiseen käytetään fotometriä tai spektrofotometriä.

Analyysin suorittamiseksi on tarpeen valmistaa proteiiniliuos, lisätä väriainetta ja mitata värin intensiteetti. Laite kalibroidaan sitten käyttämällä tunnetun pitoisuuden omaavia standardiproteiiniliuoksia. Tämän jälkeen näyte voidaan analysoida.

Kullberg-Malyarevsky-menetelmää käytetään laajalti biokemiassa ja lääketieteessä määrittämään proteiinipitoisuutta veren seerumissa, virtsassa, aivo-selkäydinnesteessä ja muissa biologisissa nesteissä. Menetelmää käytetään myös elintarviketeollisuudessa elintarvikkeiden laadun valvontaan.