Southern 印迹分析是一种识别细胞中 DNA 特定形式的方法。它是由英国生物学家埃德温·萨瑟恩 (Edwin Southern) 于 1975 年开发的。
在此方法中,首先从细胞中提取 DNA 分子,然后使用限制性核酸内切酶将其切成小片段。使用琼脂糖凝胶电泳分离这些 DNA 片段。
接下来,使用毛细管印迹将 DNA 片段转移到膜上。然后使用与所测试的 DNA 序列互补的放射性标记或荧光染料标记的 DNA 探针。该探针与膜上的互补 DNA 片段杂交。
杂交后,通过放射自显影或荧光确定探针在膜上的位置,从而可以在分离的片段中识别所需的 DNA 序列。
因此,Southern印迹可以检测所研究的细胞或组织的基因组中是否存在特定的DNA序列。
相比之下,鉴定 RNA(Northern 印迹)和蛋白质(Western 印迹)的方法类似。
Southern Blot 分析是一种用于检测细胞中特定形式 DNA 的方法。该方法由 Edward Southern 于 1975 年开发,现已成为分子生物学中最常用的方法之一。
该方法的原理是从细胞中提取DNA分子,并使用限制性酶切割成许多小片段。然后使用琼脂糖凝胶电泳按大小分离这些片段。由此产生的 DNA 片段被转移到硝酸纤维素或其他膜上,然后用特殊的基因探针进行处理。基因探针是特异性结合 DNA 特定区域的短核苷酸序列。膜与基因探针杂交后,除去任何剩余的未杂交探针,仅在膜上留下杂交的DNA片段。
放射自显影或荧光显微镜用于确定膜上是否存在特定形式的 DNA。在放射自显影的情况下,膜上涂有一层光乳液,然后将其曝光到胶片上。对于荧光显微镜,特殊的荧光标记被施加到膜上,该标记与杂交的 DNA 片段结合。
与其他方法(例如 Northern 印迹和蛋白质印迹)相比,该方法具有许多优点。例如,使用 Southern 印迹,您可以确定生物体基因组中特定形式 DNA 的存在及其位置和数量。此外,该方法还可用于确定基因组大小、基因结构和 DNA 的许多其他特征。
总之,Southern 印迹是研究 DNA 的强大技术,可用于分子生物学的许多领域,包括遗传学、免疫学、肿瘤学等。
Southern blot分析是一种识别细胞中DNA特定形式的方法,在分子生物学中用于分析遗传变异。它基于使用限制性酶将 DNA 分子分离成片段,然后使用探针检测相同的片段。
为了进行 Southern 印迹,首先裂解细胞并将 DNA 与细胞成分分离。然后使用限制酶将 DNA 分成片段。 DNA 片段被转移到硝酸纤维素膜上,该膜作为探针的载体。探针可以是放射性、荧光或生物素标记的,并与含有特定序列的 DNA 结合。
此后,膜被转移到含有先前施加到其上的 DNA 片段的凝胶上。 DNA 片段根据其大小在凝胶上进行分离,并通过染色检测与探针结合的 DNA 片段相对应的条带。
Southern blotting 用于检测遗传变异,例如突变、多态性和扩增。它还可用于确定不同组织中的基因表达以及对不同刺激的反应。
与其他印迹方法(例如 Northern 印迹和 Western 印迹)不同,Southern 印迹具有高特异性和灵敏度,可用于分析少量 DNA。这使其成为研究人类遗传学、医学遗传学和其他涉及 DNA 研究的科学领域的有用工具。