Imunoelektroforéza je metoda frakcionace sérových proteinů v agarovém gelu pomocí protilátek.
Metoda imunoelektroforézy byla vyvinuta v roce 1950. Metoda je založena na využití elektroforézy proteinů v gelu a jejich interakci s protilátkami.
Princip metody imunoelektroforézy je následující:
- Do agarového gelu se přidá krevní sérum obsahující proteiny.
- Jsou přidány protilátky, které se vážou na specifické sérové proteiny.
- Provede se gelová elektroforéza a sérové proteiny se oddělí v závislosti na jejich molekulové hmotnosti.
- Po elektroforéze se přidá roztok obsahující antigeny.
- Protilátky navázané na proteiny difundují k antigenům a tvoří komplexy.
- Když se tvoří komplexy, dochází k precipitaci – srážení.
- Sraženina se detekuje vizuálně nebo barvením.
Imunoelektroforéza tedy umožňuje identifikovat antigenní frakce v krevním séru a stanovit jejich koncentraci.
Aplikace imunoelektroforézy:
– diagnostika infekčních chorob
– stanovení titru protilátek
– studium rakovinných markerů
– studium struktury bílkovin
– hodnocení účinnosti léčby
– screening určitých onemocnění.
Imunoelektroforéza je metoda identifikace antigenních frakcí v krevním séru, která se používá ke stanovení protilátek a antigenů v biologickém materiálu. Tato metoda je založena na separaci složek séra elektroforézou a následně jejich difúzi přes agarový gel směrem ke známému imunitnímu séru. K precipitaci dochází v místě, kde se setkávají protilátka a její antigen, což umožňuje identifikaci antigenních frakcí.
Metoda imunoelektroforézy je široce používána v lékařské diagnostice k detekci infekčních onemocnění jako je tuberkulóza, syfilis, malárie a další. Tato metoda se také používá ve vědeckém výzkumu ke studiu interakce mezi proteiny a protilátkami.
V imunoelektroforetickém testu se pacientovo krevní sérum smíchá se známým imunitním sérem. Směs se poté umístí do elektroforetické komory, kde se složky séra rozdělí na různé frakce. Po separaci složky difundují v agarovém gelu směrem k imunitnímu séru. Pokud je v séru přítomen antigen odpovídající imunitní sérové protilátce, dojde k precipitaci. To umožňuje stanovit přítomnost a množství antigenu v séru.
Jednou z výhod metody imunoelektroforézy je její vysoká senzitivita a specificita. Dokáže detekovat i velmi malá množství antigenu nebo protilátky, což z něj činí nepostradatelný nástroj v lékařské diagnostice a vědeckém výzkumu.
Metoda imunoelektroforézy má však svá omezení. Například jej nelze použít k identifikaci komplexních antigenních komplexů, které mohou mít více antigenů. Imunoelektroforéza navíc vyžaduje specializované vybavení a vyškolený personál, což může omezit její dostupnost.
Imunoelektroforéza je tedy mocným nástrojem pro identifikaci antigenních frakcí a může být užitečná v lékařské diagnostice, vědeckém výzkumu a dalších oblastech. Jeho použití však vyžaduje pečlivou přípravu a použití speciálního vybavení, což může omezit jeho dostupnost pro široký okruh uživatelů.
Imunoelektroforéza je metoda imunologické analýzy, při které se detekují antigenní frakce v roztoku. Elektroforézou se oddělí složky krevního séra a difundují směrem k antigenu s následnou tvorbou precipitace.
Po přidání roztoku pro imunoelektroforézu se umístí do elektroforetického zařízení. Zařízení obsahuje dvě paralelní skleněné elektrody vystavené elektrickým částicím. Roztok se nepřetržitě míchá, prochází mezi sklenicemi a zajišťuje pohyb kladného náboje. V důsledku toho se molekuly bílkovin pohybují s určitým kladným nábojem v určeném směru.
Obecně tato metoda umožňuje identifikovat alergické reakce, určit citlivost antigenů na protilátky a mnoho dalšího.