Ανοσοηλεκτροφόρηση

Η ανοσοηλεκτροφόρηση είναι μια μέθοδος κλασματοποίησης πρωτεϊνών ορού σε γέλη άγαρ χρησιμοποιώντας αντισώματα.

Η μέθοδος ανοσοηλεκτροφόρησης αναπτύχθηκε το 1950. Η μέθοδος βασίζεται στη χρήση ηλεκτροφόρησης πρωτεϊνών σε γέλη και στην αλληλεπίδρασή τους με αντισώματα.

Η αρχή της μεθόδου ανοσοηλεκτροφόρησης είναι η εξής:

1. Ορός αίματος που περιέχει πρωτεΐνες προστίθεται στη γέλη άγαρ.
2. Προστίθενται αντισώματα που συνδέονται με συγκεκριμένες πρωτεΐνες ορού.
3. Πραγματοποιείται ηλεκτροφόρηση γέλης και οι πρωτεΐνες του ορού διαχωρίζονται ανάλογα με το μοριακό τους βάρος.
4. Μετά την ηλεκτροφόρηση, προστίθεται ένα διάλυμα που περιέχει αντιγόνα.
5. Τα αντισώματα που συνδέονται με τις πρωτεΐνες διαχέονται στα αντιγόνα και σχηματίζουν σύμπλοκα.
6. Όταν σχηματίζονται σύμπλοκα, εμφανίζεται κατακρήμνιση - κατακρήμνιση.
7. Το ίζημα ανιχνεύεται οπτικά ή με χρώση.

Έτσι, η ανοσοηλεκτροφόρηση καθιστά δυνατό τον εντοπισμό αντιγονικών κλασμάτων στον ορό του αίματος και τον προσδιορισμό της συγκέντρωσής τους.

Εφαρμογή ανοσοηλεκτροφόρησης:

– διάγνωση μολυσματικών ασθενειών
– προσδιορισμός του τίτλου αντισωμάτων
– μελέτη καρκινικών δεικτών
– μελέτη της δομής των πρωτεϊνών
– αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας
– έλεγχος για ορισμένες ασθένειες.

Η ανοσοηλεκτροφόρηση είναι μια μέθοδος αναγνώρισης αντιγονικών κλασμάτων στον ορό αίματος, η οποία χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό αντισωμάτων και αντιγόνων σε βιολογικό υλικό. Αυτή η μέθοδος βασίζεται στον διαχωρισμό των συστατικών του ορού με ηλεκτροφόρηση και στη συνέχεια στη διάχυση τους μέσω γέλης άγαρ προς έναν γνωστό ανοσοποιητικό ορό. Η καθίζηση συμβαίνει στο σημείο όπου το αντίσωμα και το αντιγόνο του συναντώνται, επιτρέποντας την ταυτοποίηση των αντιγονικών κλασμάτων.

Η μέθοδος της ανοσοηλεκτροφόρησης χρησιμοποιείται ευρέως στην ιατρική διαγνωστική για την ανίχνευση μολυσματικών ασθενειών όπως η φυματίωση, η σύφιλη, η ελονοσία και άλλες. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται επίσης στην επιστημονική έρευνα για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης μεταξύ πρωτεϊνών και αντισωμάτων.

Σε μια ανοσοηλεκτροφορητική δοκιμασία, ο ορός αίματος του ασθενούς αναμειγνύεται με έναν γνωστό ανοσοποιητικό ορό. Το μείγμα στη συνέχεια τοποθετείται σε έναν ηλεκτροφορητικό θάλαμο, όπου τα συστατικά του ορού διαχωρίζονται σε διαφορετικά κλάσματα. Μετά τον διαχωρισμό, τα συστατικά διαχέονται στη γέλη άγαρ προς τον ανοσοποιητικό ορό. Εάν ένα αντιγόνο που αντιστοιχεί σε ένα ανοσοποιητικό αντίσωμα ορού υπάρχει στον ορό, θα συμβεί κατακρήμνιση. Αυτό επιτρέπει τον προσδιορισμό της παρουσίας και της ποσότητας αντιγόνου στον ορό.

Ένα από τα πλεονεκτήματα της μεθόδου ανοσοηλεκτροφόρησης είναι η υψηλή ευαισθησία και ειδικότητά της. Μπορεί να ανιχνεύσει ακόμη και πολύ μικρές ποσότητες αντιγόνου ή αντισωμάτων, καθιστώντας το απαραίτητο εργαλείο στην ιατρική διάγνωση και την επιστημονική έρευνα.

Ωστόσο, η μέθοδος της ανοσοηλεκτροφόρησης έχει τους περιορισμούς της. Για παράδειγμα, δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό πολύπλοκων αντιγονικών συμπλεγμάτων που μπορεί να έχουν πολλαπλά αντιγόνα. Επιπλέον, η ανοσοηλεκτροφόρηση απαιτεί εξειδικευμένο εξοπλισμό και εκπαιδευμένο προσωπικό, γεγονός που μπορεί να περιορίσει τη διαθεσιμότητά του.

Έτσι, η ανοσοηλεκτροφόρηση είναι ένα ισχυρό εργαλείο για την αναγνώριση αντιγονικών κλασμάτων και μπορεί να είναι χρήσιμη στην ιατρική διαγνωστική, την επιστημονική έρευνα και άλλους τομείς. Ωστόσο, η χρήση του απαιτεί προσεκτική προετοιμασία και χρήση ειδικού εξοπλισμού, ο οποίος μπορεί να περιορίσει τη διαθεσιμότητά του σε ένα ευρύ φάσμα χρηστών.

Η ανοσοηλεκτροφόρηση είναι μια μέθοδος ανοσολογικής ανάλυσης στην οποία ανιχνεύονται αντιγονικά κλάσματα σε ένα διάλυμα. Διαχωρίζοντας τα συστατικά του ορού αίματος μέσω ηλεκτροφόρησης, διαχέονται προς το αντιγόνο με επακόλουθο σχηματισμό καθίζησης.

Μετά την προσθήκη του διαλύματος για ανοσοηλεκτροφόρηση, τοποθετείται σε συσκευή ηλεκτροφόρησης. Η συσκευή περιέχει δύο παράλληλα γυάλινα ηλεκτρόδια εκτεθειμένα σε ηλεκτρικά σωματίδια. Το διάλυμα αναδεύεται συνεχώς, περνώντας ανάμεσα στα ποτήρια και εξασφαλίζοντας την κίνηση ενός θετικού φορτίου. Ως αποτέλεσμα, τα μόρια πρωτεΐνης κινούνται με ένα ορισμένο θετικό φορτίο προς την καθορισμένη κατεύθυνση.

Γενικά, αυτή η μέθοδος σας επιτρέπει να προσδιορίσετε αλλεργικές αντιδράσεις, να προσδιορίσετε την ευαισθησία των αντιγόνων στα αντισώματα και πολλά άλλα.