Reaksi Naftol-Peroksidase

Reaksi naftol peroksidase adalah metode untuk mendeteksi peroksidase (enzim yang mengkatalisis oksidasi substrat) dalam jaringan. Metode ini didasarkan pada oksidasi naftol (senyawa anorganik) dengan hidrogen peroksida dengan adanya peroksidase. Akibatnya terbentuk asam naftolat, yang kemudian dioksidasi menjadi asam naftol-3,6-dikarboksilat. Hal ini menyebabkan terbentuknya butiran merah yang terlihat di bawah mikroskop.

Reaksi naftol peroksidase banyak digunakan dalam histologi dan sitokimia untuk mendeteksi peroksidase, yang mungkin berhubungan dengan berbagai penyakit seperti kanker, diabetes, penyakit jantung dan lain-lain. Selain itu, metode ini digunakan dalam industri biokimia untuk menentukan aktivitas peroksidase.

Salah satu keunggulan reaksi naftol peroksidase adalah sensitivitas dan spesifisitasnya yang tinggi. Hal ini memungkinkan deteksi peroksidase dalam jumlah kecil sekalipun tanpa memerlukan reagen dan peralatan yang mahal. Selain itu, metode ini dapat digunakan untuk mempelajari jaringan di berbagai tingkatan, mulai dari sel hingga seluruh organ.

Namun, seperti metode lainnya, reaksi naftol-peroksidase memiliki keterbatasan. Misalnya, dapat memberikan hasil positif palsu dengan adanya enzim lain yang juga dapat mengoksidasi naftol. Selain itu, beberapa jaringan mungkin memiliki aktivitas peroksidase yang rendah atau tidak sensitif terhadap metode ini.

Secara keseluruhan, reaksi naftol peroksidase merupakan alat yang berguna untuk mempelajari peroksidase dalam jaringan dan dapat digunakan dalam berbagai bidang kedokteran dan biologi.

Naftol (ortho-tolidine) adalah semikuinon lemah, mudah teroksidasi oleh hidrogen peroksida, sehingga membentuk kompleks merah. Dalam lingkungan basa, NaOH dengan larutan Na2S2O8 memberikan warna oranye kemerahan pada sediaan mikro. Pewarnaan ini disebabkan oleh oksidasi naftol, yang direduksi menjadi seperti kuinon oleh pewarna menjadi peroxazone klorida. Pigmen azo (eosin), yang ditambahkan pada bahan uji sebagai indikator difonia, membuat pewarnaan lebih pekat. Karena naftol memiliki kemampuan untuk mengoksidasi hanya dengan adanya produk oksidasi basa dengan campuran sulfit-bikromat; pengecatan menghilangkan sejumlah hidrogen peroksida. Sulfit dan residu aldimetinnya berkontribusi terhadap resistensi proses redoks terhadap alkali. Oleh karena itu, pewarnaan peroksida dengan benazyl, azurin dan naphthol tidak dapat dideteksi di beberapa area baik pada anak-anak maupun orang dewasa.

Reaksi naftol - peroksidase (thiacetazo - nafta).

Reaksi ini didasarkan pada kemampuan peroksida oksigenase protein alkali, yang diubah menjadi butiran merah dan disebut **tiroglobulin** atau protein alkali. Ini digunakan untuk mendeteksi enzim peroksidase dalam jaringan.

Ini juga digunakan dalam histokimia dan mikrobiologi. Metode ini memberikan akses cepat dan langsung ke lokalisasi permukaan peroksida yang telah terdeteksi pada permukaan sel. Ini telah terbukti sangat berguna dalam studi tentang peran peroksida dalam stres oksidatif