Naftol-peroxidase-reactie

De naftolperoxidasereactie is een methode voor het detecteren van peroxidasen (enzymen die de oxidatie van substraten katalyseren) in weefsels. Deze methode is gebaseerd op de oxidatie van naftol (een anorganische verbinding) met waterstofperoxide in aanwezigheid van peroxidase. Als gevolg hiervan wordt naftolzuur gevormd, dat vervolgens wordt geoxideerd tot naftol-3,6-dicarbonzuur. Dit leidt tot de vorming van rode korrels die zichtbaar zijn onder een microscoop.

Naftolperoxidasereacties worden veel gebruikt in de histologie en cytochemie voor de detectie van peroxidasen, die geassocieerd kunnen zijn met verschillende ziekten zoals kanker, diabetes, hartziekten en andere. Bovendien wordt deze methode in de biochemische industrie gebruikt om de activiteit van peroxidasen te bepalen.

Een van de voordelen van de naftolperoxidasereactie is de hoge gevoeligheid en specificiteit ervan. Het maakt de detectie mogelijk van zelfs kleine hoeveelheden peroxidasen zonder de noodzaak van dure reagentia en apparatuur. Daarnaast kan de methode worden gebruikt om weefsels op verschillende niveaus te bestuderen, van cellen tot hele organen.

Net als elke andere methode heeft de naftol-peroxidasereactie echter zijn beperkingen. Het kan bijvoorbeeld vals-positieve resultaten opleveren in de aanwezigheid van andere enzymen die ook naftol kunnen oxideren. Bovendien kunnen sommige weefsels een lage peroxidase-activiteit hebben of ongevoelig zijn voor deze methode.

Over het geheel genomen is de naftolperoxidasereactie een nuttig hulpmiddel voor het bestuderen van peroxidasen in weefsels en kan deze worden gebruikt op verschillende gebieden van de geneeskunde en de biologie.

Naftol (ortho-tolidine) is een zwak semichinon, gemakkelijk geoxideerd door waterstofperoxide, waarmee het een rood complex vormt. In een alkalische omgeving geeft NaOH met een Na2S2O8-oplossing een roodoranje kleur aan het micropreparaat. De kleuring is het gevolg van de oxidatie van naftol, dat door de kleurstof tot peroxazonchloride tot een chinonachtige toestand wordt teruggebracht. Azopigmenten (eosinen), toegevoegd aan het testmateriaal als indicator voor diffonia, maken de kleur intenser. Omdat naftol alleen kan oxideren in aanwezigheid van alkalische oxidatieproducten met een sulfiet-bichromaatmengsel; schilderen neemt een bepaalde hoeveelheid waterstofperoxide weg. Sulfieten en hun aldimethineresiduen dragen bij aan de weerstand van het redoxproces tegen alkaliën. Om deze reden kan peroxidekleuring met benazyl, azurine en naftol op sommige plaatsen zowel bij kinderen als bij volwassenen niet worden gedetecteerd.

Naftol-peroxidase (thiacetazo-nafta) reactie

De reactie is gebaseerd op het peroxide-oxygenasevermogen van alkalische eiwitten, die worden omgezet in rode korrels en **thyroglobuline** of alkalisch eiwit worden genoemd. Het wordt gebruikt om het enzym peroxidase in weefsel te detecteren.

Het wordt ook gebruikt in de histochemie en microbiologie. De methode biedt snelle, directe toegang tot de oppervlaktelokalisatie van peroxide dat op het celoppervlak is gedetecteerd. Het is bijzonder nuttig gebleken in onderzoeken naar de rol van peroxiden bij oxidatieve stress