Naftoli-peroksidaasireaktio

Naftoliperoksidaasireaktio on menetelmä peroksidaasien (substraattien hapettumista katalysoivien entsyymien) havaitsemiseksi kudoksissa. Tämä menetelmä perustuu naftolin (epäorgaanisen yhdisteen) hapetukseen vetyperoksidilla peroksidaasin läsnä ollessa. Tämän seurauksena muodostuu naftolihappoa, joka sitten hapetetaan naftoli-3,6-dikarboksyylihapoksi. Tämä johtaa punaisten rakeiden muodostumiseen, jotka näkyvät mikroskoopilla.

Naftoliperoksidaasireaktioita käytetään laajalti histologiassa ja sytokemiassa peroksidaasien havaitsemiseen, jotka voivat liittyä erilaisiin sairauksiin, kuten syöpään, diabetekseen, sydänsairauksiin ja muihin. Lisäksi tätä menetelmää käytetään biokemian teollisuudessa peroksidaasien aktiivisuuden määrittämiseen.

Yksi naftoliperoksidaasireaktion eduista on sen korkea herkkyys ja spesifisyys. Se mahdollistaa pientenkin määrien peroksidaasien havaitsemisen ilman kalliita reagensseja ja laitteita. Lisäksi menetelmällä voidaan tutkia kudoksia eri tasoilla soluista kokonaisiin elimiin.

Kuitenkin, kuten kaikilla muillakin menetelmillä, naftoli-peroksidaasireaktiolla on rajoituksensa. Se voi esimerkiksi antaa vääriä positiivisia tuloksia muiden entsyymien läsnä ollessa, jotka voivat myös hapettaa naftolia. Lisäksi joillakin kudoksilla voi olla alhainen peroksidaasiaktiivisuus tai ne voivat olla epäherkkiä tälle menetelmälle.

Kaiken kaikkiaan naftoliperoksidaasireaktio on hyödyllinen työkalu kudosten peroksidaasien tutkimiseen, ja sitä voidaan käyttää useilla lääketieteen ja biologian aloilla.

Naftoli (orto-tolidiini) on heikko semikinoni, joka hapettuu helposti vetyperoksidilla, jonka kanssa se muodostaa punaisen kompleksin. Emäksisessä ympäristössä NaOH Na2S2O8-liuoksen kanssa antaa mikrovalmisteelle punertavan oranssin värin. Väritys johtuu naftolin hapettumisesta, jonka väriaine muuttaa kinonimaiseen tilaan peroksatsonikloridiksi. Atsopigmentit (eosiinit), joita on lisätty testimateriaaliin diffonian indikaattorina, tekevät väristä voimakkaamman. Koska naftolilla on kyky hapettua vain alkalisten hapetustuotteiden läsnä ollessa sulfiitti-bikromaattiseoksen kanssa; maalaus vie tietyn määrän vetyperoksidia. Sulfiitit ja niiden aldimetiinijäännökset edistävät redox-prosessin alkalinkestävyyttä. Tästä syystä peroksidivärjäytymistä benatsyylillä, atsuriinilla ja naftolilla ei voida havaita joillakin alueilla lapsilla tai aikuisilla.

Naftoli-peroksidaasi (tiasetatso-nafta) reaktio

Reaktio perustuu emäksisten proteiinien peroksidioksigenaasikykyyn, jotka muuttuvat punaisiksi rakeiksi ja joita kutsutaan **tyroglobuliiniksi** tai alkaliproteiiniksi. Sitä käytetään peroksidaasientsyymin havaitsemiseen kudoksesta.

Sitä käytetään myös histokemiassa ja mikrobiologiassa. Menetelmä tarjoaa nopean, suoran pääsyn solun pinnalla havaitun peroksidin pintalokalisaatioon. Se on osoittautunut erityisen hyödylliseksi tutkimuksissa peroksidien roolista oksidatiivisessa stressissä