Naphthol-peroxidase reaktion

Naphtholperoxidasereaktionen er en metode til påvisning af peroxidaser (enzymer, der katalyserer oxidationen af ​​substrater) i væv. Denne metode er baseret på oxidation af naphthol (en uorganisk forbindelse) med hydrogenperoxid i nærværelse af peroxidase. Som følge heraf dannes naphtholsyre, som derefter oxideres til naphthol-3,6-dicarboxylsyre. Dette fører til dannelsen af ​​røde granula, der er synlige under et mikroskop.

Naphtholperoxidasereaktioner er almindeligt anvendt i histologi og cytokemi til påvisning af peroxidaser, som kan være forbundet med forskellige sygdomme såsom cancer, diabetes, hjertesygdomme og andre. Derudover bruges denne metode i den biokemiske industri til at bestemme aktiviteten af ​​peroxidaser.

En af fordelene ved naphtholperoxidasereaktionen er dens høje følsomhed og specificitet. Det tillader påvisning af selv små mængder peroxidaser uden behov for dyre reagenser og udstyr. Derudover kan metoden bruges til at studere væv på forskellige niveauer, fra celler til hele organer.

Som enhver anden metode har naphthol-peroxidase-reaktionen imidlertid sine begrænsninger. For eksempel kan det give falsk-positive resultater i nærværelse af andre enzymer, der også kan oxidere naphthol. Derudover kan nogle væv have lav peroxidaseaktivitet eller være ufølsomme over for denne metode.

Samlet set er naphtholperoxidasereaktionen et nyttigt værktøj til at studere peroxidaser i væv og kan bruges inden for forskellige områder inden for medicin og biologi.

Naphthol (ortho-tolidin) er en svag semiquinon, let oxideret af hydrogenperoxid, med hvilken den danner et rødt kompleks. I et alkalisk miljø giver NaOH med en Na2S2O8-opløsning en rødlig-orange farve til mikropræparatet. Farven skyldes oxidationen af ​​naphthol, reduceret til en quinon-lignende tilstand af farvestoffet til peroxazonchlorid. Azopigmenter (eosiner), tilsat testmaterialet som en indikator for diffonia, gør farvningen mere intens. Da naphthol kun har evnen til at oxidere i nærværelse af alkaliske oxidationsprodukter med en sulfit-bichromatblanding; maleri fjerner en vis mængde brintoverilte. Sulfitter og deres aldimethinrester bidrager til redoxprocessens modstand mod alkali. Af denne grund kan peroxidfarvning med benazyl, azurin og naphthol ikke påvises i nogle områder hos hverken børn eller voksne.

Naphthol - peroxidase (thiacetazo - naphtha) reaktion

Reaktionen er baseret på peroxidoxygenaseevnen hos alkaliske proteiner, som omdannes til røde granulat og kaldes **thyroglobulin** eller alkalisk protein. Det bruges til at påvise enzymet peroxidase i væv.

Det bruges også i histokemi og mikrobiologi. Metoden giver hurtig, direkte adgang til overfladelokaliseringen af ​​peroxid, der er blevet påvist på celleoverfladen. Det har vist sig særligt nyttigt i undersøgelser af peroxiders rolle i oxidativt stress