Αντίδραση Ναφθόλης-Υπεροξειδάσης

Η αντίδραση υπεροξειδάσης της ναφθόλης είναι μια μέθοδος για την ανίχνευση υπεροξειδασών (ένζυμα που καταλύουν την οξείδωση των υποστρωμάτων) στους ιστούς. Αυτή η μέθοδος βασίζεται στην οξείδωση της ναφθόλης (μιας ανόργανης ένωσης) με υπεροξείδιο του υδρογόνου παρουσία υπεροξειδάσης. Ως αποτέλεσμα, σχηματίζεται ναφθολικό οξύ, το οποίο στη συνέχεια οξειδώνεται σε ναφθολ-3,6-δικαρβοξυλικό οξύ. Αυτό οδηγεί στο σχηματισμό κόκκινων κόκκων που είναι ορατοί στο μικροσκόπιο.

Οι αντιδράσεις υπεροξειδάσης της ναφθόλης χρησιμοποιούνται ευρέως στην ιστολογία και την κυτταροχημεία για την ανίχνευση υπεροξειδασών, οι οποίες μπορεί να σχετίζονται με διάφορες ασθένειες όπως ο καρκίνος, ο διαβήτης, οι καρδιακές παθήσεις και άλλες. Επιπλέον, αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται στη βιοχημική βιομηχανία για τον προσδιορισμό της δραστηριότητας των υπεροξειδασών.

Ένα από τα πλεονεκτήματα της αντίδρασης υπεροξειδάσης της ναφθόλης είναι η υψηλή ευαισθησία και ειδικότητά της. Επιτρέπει την ανίχνευση ακόμη και μικρών ποσοτήτων υπεροξειδασών χωρίς την ανάγκη ακριβών αντιδραστηρίων και εξοπλισμού. Επιπλέον, η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη ιστών σε διάφορα επίπεδα, από κύτταρα έως ολόκληρα όργανα.

Ωστόσο, όπως κάθε άλλη μέθοδος, η αντίδραση ναφθόλης-υπεροξειδάσης έχει τους περιορισμούς της. Για παράδειγμα, μπορεί να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα παρουσία άλλων ενζύμων που μπορούν επίσης να οξειδώσουν τη ναφθόλη. Επιπλέον, ορισμένοι ιστοί μπορεί να έχουν χαμηλή δραστικότητα υπεροξειδάσης ή να μην είναι ευαίσθητοι σε αυτή τη μέθοδο.

Συνολικά, η αντίδραση υπεροξειδάσης της ναφθόλης είναι ένα χρήσιμο εργαλείο για τη μελέτη των υπεροξειδασών στους ιστούς και μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε διάφορους τομείς της ιατρικής και της βιολογίας.

Η ναφθόλη (ορθο-τολιδίνη) είναι μια αδύναμη ημικινόνη, που οξειδώνεται εύκολα από το υπεροξείδιο του υδρογόνου, με την οποία σχηματίζει ένα κόκκινο σύμπλοκο. Σε αλκαλικό περιβάλλον, το NaOH με διάλυμα Na2S2O8 δίνει ένα κοκκινωπό-πορτοκαλί χρώμα στο μικροπαρασκεύασμα. Ο χρωματισμός οφείλεται στην οξείδωση της ναφθόλης, η οποία ανάγεται σε κατάσταση παρόμοια με την κινόνη από τη βαφή σε χλωριούχο υπεροξαζόνη. Οι αζωχρωστικές (ηωσίνες), που προστίθενται στο υλικό δοκιμής ως δείκτης diffonia, κάνουν τον χρωματισμό πιο έντονο. Δεδομένου ότι η ναφθόλη έχει την ικανότητα να οξειδώνεται μόνο παρουσία προϊόντων αλκαλικής οξείδωσης με μίγμα θειώδους-διχρωμικού. Η ζωγραφική αφαιρεί μια ορισμένη ποσότητα υπεροξειδίου του υδρογόνου. Τα θειώδη και τα υπολείμματά τους αλδιμεθίνης συμβάλλουν στην αντίσταση της διεργασίας οξειδοαναγωγής στα αλκάλια. Για το λόγο αυτό, η χρώση υπεροξειδίου με βεναζύλιο, αζουρίνη και ναφθόλη δεν μπορεί να ανιχνευθεί σε ορισμένες περιοχές ούτε σε παιδιά ούτε σε ενήλικες.

Αντίδραση ναφθόλης - υπεροξειδάσης (θειακέταζο - νάφθα).

Η αντίδραση βασίζεται στην ικανότητα υπεροξειδίου της οξυγενάσης των αλκαλικών πρωτεϊνών, οι οποίες μετατρέπονται σε κόκκινα κοκκία και ονομάζονται **θυρεοσφαιρίνη** ή αλκαλική πρωτεΐνη. Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του ενζύμου υπεροξειδάση στον ιστό.

Χρησιμοποιείται επίσης στην ιστοχημεία και τη μικροβιολογία. Η μέθοδος παρέχει γρήγορη, άμεση πρόσβαση στον επιφανειακό εντοπισμό του υπεροξειδίου που έχει ανιχνευθεί στην επιφάνεια του κυττάρου. Έχει αποδειχθεί ιδιαίτερα χρήσιμο σε μελέτες του ρόλου των υπεροξειδίων στο οξειδωτικό στρες