Reakcja naftol-peroksydaza

Reakcja peroksydazy naftolowej to metoda wykrywania peroksydaz (enzymów katalizujących utlenianie substratów) w tkankach. Metoda ta polega na utlenianiu naftolu (związku nieorganicznego) nadtlenkiem wodoru w obecności peroksydazy. W rezultacie powstaje kwas naftolowy, który następnie utlenia się do kwasu naftolo-3,6-dikarboksylowego. Prowadzi to do powstania czerwonych granulek widocznych pod mikroskopem.

Reakcje peroksydazy naftolowej są szeroko stosowane w histologii i cytochemii do wykrywania peroksydaz, które mogą być związane z różnymi chorobami, takimi jak rak, cukrzyca, choroby serca i inne. Ponadto metoda ta stosowana jest w przemyśle biochemicznym do oznaczania aktywności peroksydaz.

Jedną z zalet reakcji peroksydazy naftolowej jest jej wysoka czułość i swoistość. Pozwala na wykrycie nawet niewielkich ilości peroksydaz bez konieczności stosowania drogich odczynników i sprzętu. Ponadto metodę można zastosować do badania tkanek na różnych poziomach, od komórek po całe narządy.

Jednakże, jak każda inna metoda, reakcja naftol-peroksydaza ma swoje ograniczenia. Na przykład może dawać fałszywie dodatnie wyniki w obecności innych enzymów, które mogą również utleniać naftol. Ponadto niektóre tkanki mogą mieć niską aktywność peroksydazy lub być niewrażliwe na tę metodę.

Ogólnie rzecz biorąc, reakcja peroksydazy naftolowej jest użytecznym narzędziem do badania peroksydaz w tkankach i może być stosowana w różnych dziedzinach medycyny i biologii.

Naftol (orto-tolidyna) jest słabym półchinonem, łatwo utleniającym się pod wpływem nadtlenku wodoru, z którym tworzy czerwony kompleks. W środowisku zasadowym połączenie NaOH z roztworem Na2S2O8 nadaje mikropreparatowi czerwono-pomarańczową barwę. Zabarwienie wynika z utleniania naftolu, zredukowanego do stanu podobnego do chinonu przez barwnik do chlorku peroksazonu. Pigmenty azowe (eozyny), dodawane do materiału badawczego jako wskaźnik dyfonii, powodują intensywniejsze zabarwienie. Ponieważ naftol ma zdolność utleniania tylko w obecności zasadowych produktów utleniania za pomocą mieszaniny siarczynu i dwuchromianu; malowanie usuwa pewną ilość nadtlenku wodoru. Siarczyny i ich reszty aldimetynowe przyczyniają się do odporności procesu redoks na zasady. Z tego powodu zabarwienia nadtlenkiem benazylu, azuryny i naftolu nie można wykryć w niektórych obszarach ani u dzieci, ani u dorosłych.

Reakcja naftol-peroksydaza (tiacetazo-nafta).

Reakcja opiera się na zdolności oksygenazy nadtlenkowej białek alkalicznych, które przekształcają się w czerwone granulki i nazywane są **tyreoglobuliną** lub białkiem alkalicznym. Służy do wykrywania enzymu peroksydazy w tkance.

Jest również stosowany w histochemii i mikrobiologii. Metoda zapewnia szybki, bezpośredni dostęp do powierzchniowej lokalizacji nadtlenku wykrytego na powierzchni komórki. Okazał się szczególnie przydatny w badaniach nad rolą nadtlenków w stresie oksydacyjnym