Assorbimento fotometrico

Fotometria di assorbimento: misura dell'assorbimento della luce da parte degli oggetti

La fotometria di assorbimento (o spettrofotometria) è un metodo di analisi basato sulla misurazione dell'assorbimento della luce da parte di un oggetto. È ampiamente utilizzato nella pratica di laboratorio, in particolare, per l'analisi quantitativa di sostanze biologicamente attive.

L'essenza del metodo è che la luce passa attraverso una soluzione o un altro oggetto analizzato e la sua intensità viene misurata prima e dopo aver attraversato l'oggetto. La differenza tra le misurazioni è dovuta al fatto che l'oggetto assorbe parte della luce, mentre il resto lo attraversa e raggiunge il rilevatore.

Per misurare l'assorbimento della luce viene utilizzato uno spettrofotometro, un dispositivo che misura la luce che passa attraverso l'oggetto analizzato a varie lunghezze d'onda. Questo ci permette di ottenere lo spettro di assorbimento dell'oggetto, cioè dipendenza del grado di assorbimento della luce dalla lunghezza d'onda.

La fotometria ad assorbimento è uno dei metodi più accurati per l'analisi quantitativa di sostanze biologicamente attive, ad esempio proteine, acidi nucleici, enzimi e altre molecole organiche. Trova largo impiego anche nell'analisi dell'acqua e di altri liquidi, compresi i farmaci.

Inoltre, la fotometria di assorbimento può essere utilizzata per misurare la concentrazione di una sostanza in una soluzione, nonché per determinare i parametri cinetici delle reazioni, come la velocità di reazione e la costante di velocità.

In conclusione, la fotometria di assorbimento è un importante metodo di analisi che fornisce informazioni sulle proprietà di un oggetto in base al suo spettro di assorbimento della luce. È ampiamente utilizzato nella pratica di laboratorio e aiuta a risolvere molti problemi nei campi della biologia, della chimica e della farmacologia.

La fotometria è un insieme di metodi e strumenti per misurare i parametri luminosi ed energetici della radiazione ottica, nonché immagini di oggetti in luce monocromatica o bianca. Il processo viene eseguito utilizzando speciali dispositivi fotometrici. Alcuni tipi di fotometria acquisiscono un nome e una formulazione propri, ad esempio spettrofotometria, pirometria, scienza dei materiali fotografici.

La fotometria di assorbimento - F. (dal latino assorbere - assorbire), si basa sulla registrazione dell'assorbimento della luce da parte della sostanza studiata. Utilizzato per misurare i coefficienti di assorbimento della luce di LCS e i coefficienti di estinzione delle soluzioni diluite. Nello spettro ottico le letture del fotometro sono proporzionali al valore di Dl, definito come la differenza tra i valori Dl nelle regioni assorbenti e non assorbenti dello spettro. Tipicamente questo intervallo è fissato simmetricamente su entrambi i lati della massima emissione della soluzione nella regione della lunghezza d'onda dove non sono presenti bande di assorbimento. I fotometri convenzionali consentono di registrare solo una delle forme di spettri: le curve di assorbimento della luce (LAC), che rappresentano la dipendenza logI=f(λ). Possono apparire come una linea (luce monocromatica), un picco allargato o diversi picchi allargati. La banda di assorbimento è caratterizzata dalla posizione del massimo sulla scala delle lunghezze d'onda λm e dalla profondità p ed è caratterizzata dall'ampiezza Δλ.

Viene utilizzato in vari campi della scienza, della tecnologia e dell'industria, soprattutto in chimica, fisica e biologia. I fotometri ad assorbimento vengono utilizzati in medicina per determinare il contenuto di emoglobina e globuli rossi nel sangue, per determinare la quantità di proteine ​​nel materiale biologico. La fotometria ad assorbimento viene utilizzata in apparecchiature di laboratorio come spettrofotometri e fotoelettrocolorimetri.