Fotometrinen absorptio

Absorptiofotometria: mittaa esineiden valon absorptiota

Absorptiofotometria (tai spektrofotometria) on analyysimenetelmä, joka perustuu kohteen valon absorption mittaamiseen. Sitä käytetään laajasti laboratoriokäytännössä, erityisesti biologisesti aktiivisten aineiden kvantitatiiviseen analyysiin.

Menetelmän ydin on, että valo kulkee liuoksen tai muun analysoitavan kohteen läpi ja sen intensiteetti mitataan ennen ja jälkeen kohteen läpi kulkemisen. Mittausten ero johtuu siitä, että kohde absorboi osan valosta, kun taas loput kulkevat sen läpi ja saavuttavat ilmaisimen.

Valon absorption mittaamiseen käytetään spektrofotometriä - laitetta, joka mittaa analysoitavan kohteen läpi kulkevaa valoa eri aallonpituuksilla. Näin saamme kohteen absorptiospektrin, ts. valon absorptioasteen riippuvuus aallonpituudesta.

Absorptiofotometria on yksi tarkimmista menetelmistä biologisesti aktiivisten aineiden, kuten proteiinien, nukleiinihappojen, entsyymien ja muiden orgaanisten molekyylien kvantitatiiviseen analysointiin. Sitä käytetään myös laajalti veden ja muiden nesteiden, mukaan lukien lääkkeet, analysoinnissa.

Lisäksi absorptiofotometrialla voidaan mitata aineen pitoisuutta liuoksessa sekä määrittää reaktioiden kineettiset parametrit, kuten reaktionopeus ja nopeusvakio.

Yhteenvetona voidaan todeta, että absorptiofotometria on tärkeä analyysimenetelmä, joka antaa tietoa kohteen ominaisuuksista sen valon absorptiospektrin perusteella. Sitä käytetään laajasti laboratoriokäytännöissä ja se auttaa ratkaisemaan monia biologian, kemian ja farmakologian ongelmia.

Fotometria on joukko menetelmiä ja laitteita optisen säteilyn valo- ja energiaparametrien mittaamiseen sekä kohteiden kuvien mittaamiseen monokromaattisessa tai valkoisessa valossa. Prosessi suoritetaan erityisillä fotometrisilla laitteilla. Tietyt fotometriatyypit saavat oman nimensä ja muotoilunsa, esimerkiksi spektrofotometria, pyrometria, valokuvausmateriaalitiede.

Absorptiofotometria - F. (latinasta absorbere - absorboida) perustuu tutkittavan aineen valon absorption tallentamiseen. Käytetään mittaamaan LCS:n valon absorptiokertoimia ja laimennettujen liuosten ekstinktiokertoimia. Optisessa spektrissä fotometrin lukemat ovat verrannollisia Dl:n arvoon, joka määritellään spektrin absorboivien ja ei-absorboivien alueiden Dl-arvojen erotuksena. Tyypillisesti tämä intervalli asetetaan symmetrisesti liuoksen maksimiemission molemmille puolille aallonpituusalueella, jossa ei ole absorptiokaistoja. Perinteiset fotometrit mahdollistavat vain yhden spektrin muodon tallentamisen - valon absorptiokäyrät (LAC), jotka edustavat riippuvuutta logI=f(λ). Ne voivat näkyä viivana (monokromaattinen valo), levennetynä huipuna tai useana leventyneenä piikinä. Absorptiokaistalle on tunnusomaista maksimin sijainti aallonpituusasteikolla λm ja syvyys p ja leveys Δλ.

Sitä käytetään useilla tieteen, tekniikan ja teollisuuden aloilla, erityisesti kemiassa, fysiikassa ja biologiassa. Absorptiofotometrejä käytetään lääketieteessä määrittämään veren hemoglobiini- ja punasolupitoisuutta, määrittämään proteiinien määrää biologisessa materiaalissa. Absorptiofotometriaa käytetään laboratoriolaitteissa, kuten spektrofotometrit ja fotoelektrokolorimetrit.