Fotometri Absorpsjon

Absorpsjonsfotometri: måling av lysabsorpsjon av objekter

Absorpsjonsfotometri (eller spektrofotometri) er en analysemetode basert på måling av lysabsorpsjon av et objekt. Det er mye brukt i laboratoriepraksis, spesielt for kvantitativ analyse av biologisk aktive stoffer.

Essensen av metoden er at lys passerer gjennom en løsning eller et annet objekt som analyseres, og dets intensitet måles før og etter at det har gått gjennom objektet. Forskjellen mellom målingene skyldes at objektet absorberer noe av lyset, mens resten passerer gjennom det og når detektoren.

For å måle lysabsorpsjon brukes et spektrofotometer – en enhet som måler lyset som passerer gjennom objektet som analyseres ved ulike bølgelengder. Dette gjør at vi kan oppnå absorpsjonsspekteret til objektet, dvs. avhengighet av graden av lysabsorpsjon av bølgelengde.

Absorpsjonsfotometri er en av de mest nøyaktige metodene for kvantitativ analyse av biologisk aktive stoffer, for eksempel proteiner, nukleinsyrer, enzymer og andre organiske molekyler. Det er også mye brukt i analyse av vann og andre væsker, inkludert narkotika.

I tillegg kan absorpsjonsfotometri brukes til å måle konsentrasjonen av et stoff i en løsning, samt for å bestemme de kinetiske parameterne for reaksjoner, som reaksjonshastigheten og hastighetskonstanten.

Avslutningsvis er absorpsjonsfotometri en viktig analysemetode som gir informasjon om egenskapene til et objekt basert på lysabsorpsjonsspekteret. Det er mye brukt i laboratoriepraksis og hjelper til med å løse mange problemer innen biologi, kjemi og farmakologi.

Fotometri er et sett med metoder og instrumenter for å måle lys- og energiparametre for optisk stråling, samt bilder av objekter i monokromatisk eller hvitt lys. Prosessen utføres ved hjelp av spesielle fotometriske enheter. Visse typer fotometri får sitt eget navn og sin egen formulering, for eksempel spektrofotometri, pyrometri, fotografisk materialvitenskap.

Absorpsjonsfotometri - F. (fra latin absorbere - å absorbere), er basert på registrering av lysabsorpsjon av stoffet som studeres. Brukes til å måle lysabsorpsjonskoeffisienter for LCS og ekstinksjonskoeffisienter for fortynnede løsninger. I det optiske spekteret er fotometeravlesninger proporsjonale med verdien av Dl, definert som forskjellen mellom Dl-verdiene i de absorberende og ikke-absorberende områdene av spekteret. Vanligvis settes dette intervallet symmetrisk på begge sider av den maksimale emisjonen av løsningen i bølgelengdeområdet der det ikke er absorpsjonsbånd. Konvensjonelle fotometre tillater registrering av bare en av formene for spektre - lysabsorpsjonskurver (LAC), som representerer avhengigheten logI=f(λ). De kan vises som en linje (monokromatisk lys), en utvidet topp eller flere utvidede topper. Absorpsjonsbåndet er karakterisert ved posisjonen til maksimum på bølgelengdeskalaen λm og dybden p og er karakterisert ved bredden Δλ.

Den brukes innen ulike felt innen vitenskap, teknologi og industri, spesielt innen kjemi, fysikk og biologi. Absorpsjonsfotometre brukes i medisin for å bestemme innholdet av hemoglobin og røde blodlegemer i blodet, for å bestemme mengden proteiner i biologisk materiale. Absorpsjonsfotometri brukes i laboratorieutstyr som spektrofotometre og fotoelektrokolorimetre.