Fotometrie Absorpce

Absorpční fotometrie: měření světelné absorpce předmětů

Absorpční fotometrie (neboli spektrofotometrie) je analytická metoda založená na měření absorpce světla objektem. Je široce používán v laboratorní praxi, zejména pro kvantitativní analýzu biologicky aktivních látek.

Podstatou metody je, že světlo prochází roztokem nebo jiným předmětem, který je analyzován, a jeho intenzita se měří před a po průchodu předmětem. Rozdíl mezi měřeními je způsoben tím, že objekt část světla absorbuje, zatímco zbytek jím prochází a dostává se k detektoru.

K měření absorpce světla se používá spektrofotometr - zařízení, které měří světlo procházející analyzovaným objektem na různých vlnových délkách. To nám umožňuje získat absorpční spektrum objektu, tzn. závislost stupně absorpce světla na vlnové délce.

Absorpční fotometrie je jednou z nejpřesnějších metod pro kvantitativní analýzu biologicky aktivních látek, např. proteinů, nukleových kyselin, enzymů a dalších organických molekul. Je také široce používán při analýze vody a jiných kapalin, včetně léků.

Absorpční fotometrii lze navíc použít k měření koncentrace látky v roztoku a také ke stanovení kinetických parametrů reakcí, jako je rychlost reakce a rychlostní konstanta.

Závěrem lze říci, že absorpční fotometrie je důležitou analytickou metodou, která poskytuje informace o vlastnostech objektu na základě jeho světelného absorpčního spektra. Je široce používán v laboratorní praxi a pomáhá řešit mnoho problémů z oblasti biologie, chemie a farmakologie.

Fotometrie je soubor metod a přístrojů pro měření světelných a energetických parametrů optického záření a také snímků objektů v monochromatickém nebo bílém světle. Proces se provádí pomocí speciálních fotometrických zařízení. Některé typy fotometrie získávají svůj vlastní název a formulaci, například spektrofotometrie, pyrometrie, nauka o fotografických materiálech.

Absorpční fotometrie - F. (z latinského absorbere - absorbovat), je založena na záznamu absorpce světla zkoumanou látkou. Používá se k měření koeficientů absorpce světla LCS a koeficientů extinkce zředěných roztoků. V optickém spektru jsou hodnoty fotometru úměrné hodnotě Dl, definované jako rozdíl mezi hodnotami Dl v absorbujících a neabsorbujících oblastech spektra. Typicky je tento interval nastaven symetricky na obou stranách maximální emise roztoku v oblasti vlnových délek, kde nejsou žádná absorpční pásma. Běžné fotometry umožňují zaznamenávat pouze jednu z forem spekter - křivky absorpce světla (LAC), které představují závislost logI=f(λ). Mohou se jevit jako čára (monochromatické světlo), rozšířený vrchol nebo několik rozšířených vrcholů. Absorpční pásmo je charakterizováno polohou maxima na stupnici vlnových délek λm a hloubkou p a je charakterizováno šířkou Δλ.

Používá se v různých oblastech vědy, techniky a průmyslu, zejména v chemii, fyzice a biologii. Absorpční fotometry se v medicíně používají ke stanovení obsahu hemoglobinu a červených krvinek v krvi, ke stanovení množství bílkovin v biologickém materiálu. Absorpční fotometrie se používá v laboratorních zařízeních, jako jsou spektrofotometry a fotoelektrokolorimetry.