Absorptionsfotometri: måling af genstandes lysabsorption
Absorptionsfotometri (eller spektrofotometri) er en analysemetode baseret på måling af lysabsorption af et objekt. Det er meget udbredt i laboratoriepraksis, især til kvantitativ analyse af biologisk aktive stoffer.
Essensen af metoden er, at lys passerer gennem en opløsning eller et andet objekt, der analyseres, og dets intensitet måles før og efter det har passeret gennem objektet. Forskellen mellem målingerne skyldes, at objektet absorberer noget af lyset, mens resten passerer igennem det og når detektoren.
Til at måle lysabsorption bruges et spektrofotometer - en enhed, der måler lyset, der passerer gennem det objekt, der analyseres, ved forskellige bølgelængder. Dette giver os mulighed for at opnå absorptionsspektret for objektet, dvs. afhængighed af graden af lysabsorption af bølgelængde.
Absorptionsfotometri er en af de mest nøjagtige metoder til kvantitativ analyse af biologisk aktive stoffer, for eksempel proteiner, nukleinsyrer, enzymer og andre organiske molekyler. Det er også meget udbredt til analyse af vand og andre væsker, herunder lægemidler.
Derudover kan absorptionsfotometri bruges til at måle koncentrationen af et stof i en opløsning, samt til at bestemme de kinetiske parametre for reaktioner, såsom reaktionshastigheden og hastighedskonstanten.
Afslutningsvis er absorptionsfotometri en vigtig analysemetode, der giver information om et objekts egenskaber baseret på dets lysabsorptionsspektrum. Det er meget udbredt i laboratoriepraksis og hjælper med at løse mange problemer inden for biologi, kemi og farmakologi.
Fotometri er et sæt metoder og instrumenter til måling af lys- og energiparametre for optisk stråling samt billeder af objekter i monokromatisk eller hvidt lys. Processen udføres ved hjælp af specielle fotometriske enheder. Visse typer fotometri får deres eget navn og formulering, for eksempel spektrofotometri, pyrometri, fotografisk materialevidenskab.
Absorptionsfotometri - F. (fra latin absorbere - at absorbere), er baseret på registrering af lysabsorption af det undersøgte stof. Bruges til at måle lysabsorptionskoefficienter for LCS og ekstinktionskoefficienter for fortyndede opløsninger. I det optiske spektrum er fotometeraflæsninger proportionale med værdien af Dl, defineret som forskellen mellem Dl-værdierne i de absorberende og ikke-absorberende områder af spektret. Typisk er dette interval sat symmetrisk på begge sider af den maksimale emission af opløsningen i bølgelængdeområdet, hvor der ikke er nogen absorptionsbånd. Konventionelle fotometre tillader kun optagelse af en af formerne for spektre - lysabsorptionskurver (LAC'er), som repræsenterer afhængigheden logI=f(λ). De kan fremstå som en linje (monokromatisk lys), en udvidet top eller flere udvidede toppe. Absorptionsbåndet er karakteriseret ved positionen af maksimum på bølgelængdeskalaen λm og dybden p og er karakteriseret ved bredden Δλ.
Det bruges inden for forskellige områder af videnskab, teknologi og industri, især inden for kemi, fysik og biologi. Absorptionsfotometre bruges i medicin til at bestemme indholdet af hæmoglobin og røde blodlegemer i blodet, til at bestemme mængden af proteiner i biologisk materiale. Absorptionsfotometri bruges i laboratorieudstyr såsom spektrofotometre og fotoelektrokolorimetre.