Soğurma fotometrisi: nesnelerin ışık emiliminin ölçülmesi
Soğurma fotometrisi (veya spektrofotometri), bir nesne tarafından ışık emiliminin ölçülmesine dayanan bir analiz yöntemidir. Laboratuvar uygulamalarında, özellikle biyolojik olarak aktif maddelerin kantitatif analizinde yaygın olarak kullanılmaktadır.
Yöntemin özü, ışığın analiz edilen bir çözeltiden veya başka bir nesneden geçmesi ve yoğunluğunun nesneden geçmeden önce ve geçtikten sonra ölçülmesidir. Ölçümler arasındaki fark, nesnenin ışığın bir kısmını soğurması, geri kalanının ise içinden geçerek dedektöre ulaşmasından kaynaklanmaktadır.
Işık emilimini ölçmek için, analiz edilen nesneden geçen ışığı çeşitli dalga boylarında ölçen bir cihaz olan bir spektrofotometre kullanılır. Bu, nesnenin absorpsiyon spektrumunu elde etmemizi sağlar; ışık emiliminin derecesinin dalga boyuna bağımlılığı.
Absorbsiyon fotometrisi, proteinler, nükleik asitler, enzimler ve diğer organik moleküller gibi biyolojik olarak aktif maddelerin kantitatif analizi için en doğru yöntemlerden biridir. Ayrıca su ve ilaçlar dahil diğer sıvıların analizinde de yaygın olarak kullanılmaktadır.
Ek olarak, absorpsiyon fotometrisi, bir maddenin bir çözelti içindeki konsantrasyonunu ölçmek ve ayrıca reaksiyon hızı ve hız sabiti gibi reaksiyonların kinetik parametrelerini belirlemek için kullanılabilir.
Sonuç olarak absorpsiyon fotometrisi, bir nesnenin ışık absorpsiyon spektrumuna dayanarak özellikleri hakkında bilgi sağlayan önemli bir analiz yöntemidir. Laboratuvar uygulamalarında yaygın olarak kullanılmakta ve biyoloji, kimya ve farmakoloji alanlarındaki birçok problemin çözümüne yardımcı olmaktadır.
Fotometri, optik radyasyonun ışık ve enerji parametrelerinin yanı sıra monokromatik veya beyaz ışıktaki nesnelerin görüntülerini ölçmek için kullanılan bir dizi yöntem ve araçtır. İşlem özel fotometrik cihazlar kullanılarak gerçekleştirilir. Spektrofotometri, pirometri, fotografik malzeme bilimi gibi belirli fotometri türleri kendi adlarını ve formülasyonlarını alır.
Absorbsiyon fotometrisi - F. (Latince absorbere'den - absorbe etmek), incelenen madde tarafından ışık emiliminin kaydedilmesine dayanır. LCS'nin ışık absorpsiyon katsayılarını ve seyreltik çözeltilerin sönme katsayılarını ölçmek için kullanılır. Optik spektrumda fotometre okumaları, spektrumun emici ve emici olmayan bölgelerindeki Dl değerleri arasındaki fark olarak tanımlanan Dl değeriyle orantılıdır. Tipik olarak bu aralık, absorpsiyon bantlarının olmadığı dalga boyu bölgesinde çözeltinin maksimum emisyonunun her iki tarafında simetrik olarak ayarlanır. Geleneksel fotometreler, logI=f(λ) bağımlılığını temsil eden spektrum ışık absorpsiyon eğrilerinden (LAC'ler) yalnızca birinin kaydedilmesine izin verir. Bir çizgi (tek renkli ışık), genişletilmiş bir tepe noktası veya birkaç genişlemiş tepe noktası olarak görünebilirler. Absorbsiyon bandı, dalga boyu ölçeği λm ve derinlik p üzerindeki maksimumun konumu ve Δλ genişliği ile karakterize edilir.
Kimya, fizik ve biyoloji başta olmak üzere bilim, teknoloji ve endüstrinin çeşitli alanlarında kullanılmaktadır. Absorbsiyon fotometreleri tıpta kandaki hemoglobin ve kırmızı kan hücrelerinin içeriğini belirlemek, biyolojik materyaldeki protein miktarını belirlemek için kullanılır. Absorbsiyon fotometrisi, spektrofotometreler ve fotoelektrokolorimetreler gibi laboratuvar ekipmanlarında kullanılır.