Φωτομετρία Απορρόφηση

Φωτομετρία απορρόφησης: μέτρηση της απορρόφησης φωτός των αντικειμένων

Η φωτομετρία απορρόφησης (ή φασματοφωτομετρία) είναι μια μέθοδος ανάλυσης που βασίζεται στη μέτρηση της απορρόφησης φωτός από ένα αντικείμενο. Χρησιμοποιείται ευρέως στην εργαστηριακή πρακτική, ιδίως για την ποσοτική ανάλυση βιολογικά δραστικών ουσιών.

Η ουσία της μεθόδου είναι ότι το φως διέρχεται από ένα διάλυμα ή άλλο αντικείμενο που αναλύεται και η έντασή του μετράται πριν και μετά τη διέλευση από το αντικείμενο. Η διαφορά μεταξύ των μετρήσεων οφείλεται στο γεγονός ότι το αντικείμενο απορροφά μέρος του φωτός, ενώ το υπόλοιπο περνά μέσα από αυτό και φτάνει στον ανιχνευτή.

Για τη μέτρηση της απορρόφησης φωτός, χρησιμοποιείται ένα φασματοφωτόμετρο - μια συσκευή που μετρά το φως που διέρχεται από το αντικείμενο που αναλύεται σε διάφορα μήκη κύματος. Αυτό μας επιτρέπει να λάβουμε το φάσμα απορρόφησης του αντικειμένου, δηλ. εξάρτηση του βαθμού απορρόφησης φωτός από το μήκος κύματος.

Η φωτομετρία απορρόφησης είναι μια από τις πιο ακριβείς μεθόδους για την ποσοτική ανάλυση βιολογικά δραστικών ουσιών, για παράδειγμα, πρωτεϊνών, νουκλεϊκών οξέων, ενζύμων και άλλων οργανικών μορίων. Χρησιμοποιείται επίσης ευρέως στην ανάλυση νερού και άλλων υγρών, συμπεριλαμβανομένων των φαρμάκων.

Επιπλέον, η φωτομετρία απορρόφησης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μέτρηση της συγκέντρωσης μιας ουσίας σε ένα διάλυμα, καθώς και για τον προσδιορισμό των κινητικών παραμέτρων των αντιδράσεων, όπως ο ρυθμός αντίδρασης και η σταθερά ταχύτητας.

Συμπερασματικά, η φωτομετρία απορρόφησης είναι μια σημαντική μέθοδος ανάλυσης που παρέχει πληροφορίες για τις ιδιότητες ενός αντικειμένου με βάση το φάσμα απορρόφησης φωτός του. Χρησιμοποιείται ευρέως στην εργαστηριακή πρακτική και βοηθά στην επίλυση πολλών προβλημάτων στους τομείς της βιολογίας, της χημείας και της φαρμακολογίας.

Η φωτομετρία είναι ένα σύνολο μεθόδων και οργάνων για τη μέτρηση των παραμέτρων φωτός και ενέργειας της οπτικής ακτινοβολίας, καθώς και εικόνων αντικειμένων σε μονόχρωμο ή λευκό φως. Η διαδικασία πραγματοποιείται με τη χρήση ειδικών φωτομετρικών συσκευών. Ορισμένοι τύποι φωτομετρίας αποκτούν το δικό τους όνομα και διατύπωση, για παράδειγμα φασματοφωτομετρία, πυρομετρία, επιστήμη φωτογραφικών υλικών.

Η φωτομετρία απορρόφησης - F. (από το λατινικό absorbere - to absorb), βασίζεται στην καταγραφή της απορρόφησης φωτός από την υπό μελέτη ουσία. Χρησιμοποιείται για τη μέτρηση των συντελεστών απορρόφησης φωτός του LCS και των συντελεστών απόσβεσης αραιωμένων διαλυμάτων. Στο οπτικό φάσμα, οι μετρήσεις του φωτόμετρου είναι ανάλογες με την τιμή του Dl, που ορίζεται ως η διαφορά μεταξύ των τιμών Dl στις απορροφητικές και μη απορροφητικές περιοχές του φάσματος. Συνήθως, αυτό το διάστημα ρυθμίζεται συμμετρικά και στις δύο πλευρές της μέγιστης εκπομπής του διαλύματος στην περιοχή μήκους κύματος όπου δεν υπάρχουν ζώνες απορρόφησης. Τα συμβατικά φωτόμετρα επιτρέπουν την καταγραφή μόνο μιας από τις μορφές φασμάτων - καμπυλών απορρόφησης φωτός (LACs), που αντιπροσωπεύουν την εξάρτηση logI=f(λ). Μπορούν να εμφανίζονται ως μια γραμμή (μονόχρωμο φως), μια διευρυμένη κορυφή ή πολλές διευρυμένες κορυφές. Η ζώνη απορρόφησης χαρακτηρίζεται από τη θέση του μέγιστου στην κλίμακα μήκους κύματος λm και το βάθος p και χαρακτηρίζεται από το πλάτος Δλ.

Χρησιμοποιείται σε διάφορους τομείς της επιστήμης, της τεχνολογίας και της βιομηχανίας, ιδιαίτερα στη χημεία, τη φυσική και τη βιολογία. Τα φωτόμετρα απορρόφησης χρησιμοποιούνται στην ιατρική για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε αιμοσφαιρίνη και ερυθρών αιμοσφαιρίων στο αίμα, για τον προσδιορισμό της ποσότητας πρωτεϊνών σε βιολογικό υλικό. Η φωτομετρία απορρόφησης χρησιμοποιείται σε εργαστηριακό εξοπλισμό όπως φασματοφωτόμετρα και φωτοηλεκτροχρωμόμετρα.