Fotometria de absorção: medindo a absorção de luz de objetos
A fotometria de absorção (ou espectrofotometria) é um método de análise baseado na medição da absorção de luz por um objeto. É amplamente utilizado na prática laboratorial, em particular, para análise quantitativa de substâncias biologicamente ativas.
A essência do método é que a luz passa através de uma solução ou outro objeto que está sendo analisado, e sua intensidade é medida antes e depois de passar pelo objeto. A diferença entre as medidas se deve ao fato de o objeto absorver parte da luz, enquanto o restante passa por ele e chega ao detector.
Para medir a absorção de luz, é utilizado um espectrofotômetro - dispositivo que mede a luz que passa pelo objeto analisado em vários comprimentos de onda. Isso nos permite obter o espectro de absorção do objeto, ou seja, dependência do grau de absorção de luz no comprimento de onda.
A fotometria de absorção é um dos métodos mais precisos para a análise quantitativa de substâncias biologicamente ativas, por exemplo, proteínas, ácidos nucléicos, enzimas e outras moléculas orgânicas. Também é amplamente utilizado na análise de água e outros líquidos, inclusive medicamentos.
Além disso, a fotometria de absorção pode ser utilizada para medir a concentração de uma substância em uma solução, bem como para determinar os parâmetros cinéticos das reações, como a taxa de reação e a constante de velocidade.
Concluindo, a fotometria de absorção é um importante método de análise que fornece informações sobre as propriedades de um objeto com base no seu espectro de absorção de luz. É amplamente utilizado na prática laboratorial e ajuda a resolver muitos problemas nas áreas de biologia, química e farmacologia.
A fotometria é um conjunto de métodos e instrumentos para medir parâmetros de luz e energia da radiação óptica, bem como imagens de objetos em luz monocromática ou branca. O processo é realizado por meio de dispositivos fotométricos especiais. Certos tipos de fotometria adquirem nome e formulação próprios, por exemplo espectrofotometria, pirometria, ciência de materiais fotográficos.
A fotometria de absorção - F. (do latim absorvere - absorver), baseia-se no registro da absorção de luz pela substância em estudo. Usado para medir coeficientes de absorção de luz de LCS e coeficientes de extinção de soluções diluídas. No espectro óptico, as leituras do fotômetro são proporcionais ao valor de Dl, definido como a diferença entre os valores de Dl nas regiões absorventes e não absorventes do espectro. Normalmente, este intervalo é definido simetricamente em ambos os lados da emissão máxima da solução na região do comprimento de onda onde não há bandas de absorção. Os fotômetros convencionais permitem registrar apenas uma das formas dos espectros - curvas de absorção de luz (LACs), que representam a dependência logI=f(λ). Eles podem aparecer como uma linha (luz monocromática), um pico alargado ou vários picos alargados. A banda de absorção é caracterizada pela posição do máximo na escala de comprimento de onda λm e pela profundidade p e é caracterizada pela largura Δλ.
É utilizado em diversos campos da ciência, tecnologia e indústria, especialmente em química, física e biologia. Os fotômetros de absorção são usados na medicina para determinar o conteúdo de hemoglobina e glóbulos vermelhos no sangue, para determinar a quantidade de proteínas no material biológico. A fotometria de absorção é utilizada em equipamentos de laboratório, como espectrofotômetros e fotoeletrocolorímetros.