Fotometrie Absorptie

Absorptiefotometrie: het meten van de lichtabsorptie van objecten

Absorptiefotometrie (of spectrofotometrie) is een analysemethode gebaseerd op het meten van de lichtabsorptie door een object. Het wordt veel gebruikt in de laboratoriumpraktijk, met name voor de kwantitatieve analyse van biologisch actieve stoffen.

De essentie van de methode is dat licht door een oplossing of ander object gaat dat wordt geanalyseerd, en dat de intensiteit ervan wordt gemeten vóór en na het passeren van het object. Het verschil tussen de metingen wordt veroorzaakt door het feit dat het object een deel van het licht absorbeert, terwijl de rest er doorheen gaat en de detector bereikt.

Om de lichtabsorptie te meten, wordt een spectrofotometer gebruikt: een apparaat dat het licht meet dat op verschillende golflengten door het te analyseren object gaat. Hierdoor kunnen we het absorptiespectrum van het object verkrijgen, d.w.z. afhankelijkheid van de mate van lichtabsorptie van de golflengte.

Absorptiefotometrie is een van de meest nauwkeurige methoden voor de kwantitatieve analyse van biologisch actieve stoffen, bijvoorbeeld eiwitten, nucleïnezuren, enzymen en andere organische moleculen. Het wordt ook veel gebruikt bij de analyse van water en andere vloeistoffen, waaronder medicijnen.

Bovendien kan absorptiefotometrie worden gebruikt om de concentratie van een stof in een oplossing te meten, en om de kinetische parameters van reacties te bepalen, zoals de reactiesnelheid en snelheidsconstante.

Concluderend is absorptiefotometrie een belangrijke analysemethode die informatie geeft over de eigenschappen van een object op basis van zijn lichtabsorptiespectrum. Het wordt veel gebruikt in de laboratoriumpraktijk en helpt bij het oplossen van veel problemen op het gebied van biologie, scheikunde en farmacologie.

Fotometrie is een reeks methoden en instrumenten voor het meten van licht- en energieparameters van optische straling, evenals afbeeldingen van objecten in monochromatisch of wit licht. Het proces wordt uitgevoerd met behulp van speciale fotometrische apparaten. Bepaalde soorten fotometrie krijgen een eigen naam en formulering, bijvoorbeeld spectrofotometrie, pyrometrie, fotografische materiaalkunde.

Absorptiefotometrie - F. (van het Latijnse absorbere - absorberen), is gebaseerd op het registreren van de lichtabsorptie door de onderzochte stof. Wordt gebruikt om de lichtabsorptiecoëfficiënten van LCS en de uitdovingscoëfficiënten van verdunde oplossingen te meten. In het optische spectrum zijn de aflezingen van de fotometer evenredig met de waarde van Dl, gedefinieerd als het verschil tussen de Dl-waarden in de absorberende en niet-absorberende gebieden van het spectrum. Typisch wordt dit interval symmetrisch ingesteld aan beide zijden van de maximale emissie van de oplossing in het golflengtegebied waar er geen absorptiebanden zijn. Conventionele fotometers maken het mogelijk slechts één van de vormen van spectra vast te leggen: lichtabsorptiecurven (LAC's), die de afhankelijkheid logI=f(λ) vertegenwoordigen. Ze kunnen verschijnen als een lijn (monochromatisch licht), een verbrede piek of meerdere verbrede pieken. De absorptieband wordt gekenmerkt door de positie van het maximum op de golflengteschaal λm en de diepte p en wordt gekenmerkt door de breedte Δλ.

Het wordt gebruikt op verschillende gebieden van wetenschap, technologie en industrie, vooral in de scheikunde, natuurkunde en biologie. Absorptiefotometers worden in de geneeskunde gebruikt om het gehalte aan hemoglobine en rode bloedcellen in het bloed te bepalen, om de hoeveelheid eiwitten in biologisch materiaal te bepalen. Absorptiefotometrie wordt gebruikt in laboratoriumapparatuur zoals spectrofotometers en foto-elektrocolorimeters.